石蠟切片優點較多,但在制片過程中要經過酒精、二甲苯等有機溶劑處理,組織內抗原活性失去較多,有人采用冷凍干燥包埋法(Freezedryingembeddingmethed),可以保存組織內可溶性物質,防止蛋白變性和酶的失活,從而減少了抗原的丟失。該法是將新鮮組織...
病理切片的制作步驟注意事項:負責組織處理的技術員從醫生手中收標本時,必須清點查對,無誤后簽收;組織脫水、包埋、切片、染色、封片等,均應按照技術規范進行,對每道工序,都必須查對組織數量,檢查是否遺漏、丟失;大小標本必須分開處理,大標本固定時間不得少于6小時;小標...
CyFlow Analyser倍性分析儀:1、染色速度快:DNA倍體標本上機檢測小于2分鐘 。2、配備365nm光源,高效激發DAPI染料,避免RNA的影響和次生代謝物的影響 。3、配備532nm光源,高效激發PI染料,激發效率遠超488nm和561激光器。 ...
較簡單的流式細胞儀可用于檢測細胞特征,包括細胞大小、細胞數量、細胞周期和細胞表型分析等。該技術可為研究人員提供單個細胞的高度特異性信息。從表達綠色熒光蛋白的細胞系到來源于組織的異質細胞群體,都是典型的流式樣品類型。實現高效流式細胞分析的關鍵要求是將樣品制備成單...
流式細胞分析是一種現代分析技術,其在生物學和醫學領域被范圍廣使用,具有“實驗室的 CT”之稱。雖然流式細胞術在植物研究中起步較晚,但由于它具有制樣簡單用量少、操作高效快速且數據重復性高等優勢,已逐漸發展為一種常用的植物基因組大小或植物倍性研究方法。植物的核 D...
較簡單的流式細胞儀可用于檢測細胞特征,包括細胞大小、細胞數量、細胞周期和細胞表型分析等。該技術可為研究人員提供單個細胞的高度特異性信息。從表達綠色熒光蛋白的細胞系到來源于組織的異質細胞群體,都是典型的流式樣品類型。實現高效流式細胞分析的關鍵要求是將樣品制備成單...
流式細胞儀主要由流動室及液流系統、激光器及光學系統、光電管及檢測系統、計算機及分析系統組成。流式細胞儀的流體系統負責將樣品從樣品管轉移到流動池。一旦通過流動池(并通過激光束),樣品將被分選出來(在細胞分選儀中)或移到廢液中。光學系統的元件包括激發光源、透鏡和濾...
CyFlow Ploidy Analysere倍性分析儀一機全能:1、特殊設計,專為醫學、農業科學、育種及水產養殖領域提供完美的倍性和周期解決方案2、配備365nm光源,高效激發DAPI染料,避免RNA的影響和次生代謝物的影響3、配備532nm光源,高效激發P...
CyFlow Ploidy Analyser Demo倍性分析儀注意事項:1、儀器的外殼不要隨意打開;、2實驗樣品的前處理要和儀器盡量避開,比方液體飛濺損傷儀器;3、上機操作請一定要進行應用培訓,或者請參加過培訓的老師、同學進行指導,切不可單獨上機;、4制作好...
倍性分析儀的優勢:1、檢測范圍廣,可檢測顆粒范圍為50nm-200um;2、型號選擇多,更多元化的選擇,可根據用戶需求量身定制3、激光干擾少,空間立體激發,多個光源互不干擾4、測試結果準,參數更優,有較高效的532nm的激光器適用于PI染料,高靈敏度的激光光源...
作為時下的熱點技術,數字PCR是將核酸樣品分配到大量單獨、平行的微反應單元(nL,納升級別)中,使得每個反應單元中盡可能含有1個模板分子,并在此基礎上進行擴增、檢測和分布統計,從而實現靶標分子的比較 計數。(圖:數字PCR技術原理)根據微反應單元的不同形式,數...
數字PCR系統的分散方式決定了分散數量,其結果基于統計的方法進行定量,增加反應單元數量(統計樣本量),可以增加其檢測的容量和動態檢測線性范圍達到和qPCR相近的動態范圍,同時減小一個反應單元中包含多個分子所造成的誤差,達到提高靈敏度和準確度。影響dPCR定量結...
數字PCR產品的發展,為不同場景下的多樣化核酸檢測需求提供了新的思路,尤其是在醫學檢驗方面,在 性疾病早期檢測、病癥的液體活檢、無創產前檢查等領域展現出良好的應用前景。實現 性疾病早期高效檢測——以病毒為例,有病毒檢測、和臨床樣本病毒載量評估H...
PCR(PolymeraseChainReaction)技術,即聚合酶連反應,是一種擴大和復制目的片段DNA的技術,其發現對于生命科學的發展具有重要的意義。而3D數字PCR到底是什么鬼?它其實是出現的一款PCR儀,其具有對目的DNA分子做出定量的優點,進而提供...
數字聚合酶鏈式反應(digitalpolymerchainreaction,dPCR)技術因具有高靈敏度、受基質干擾少等優勢而被廣用于轉基因食品檢測。本研究綜述了數字PCR技術的原理、系統各部件的優劣勢,梳理了數字PCR技術在轉基因檢測與溯源技術(標準物質)方...
微滴數字PCR主要是將兩種互不相溶的液體,以其中一種作為連續相(油),另一種作為分散相(水),在水/油兩相表面張力和剪切共同作用下分散相以微小體積單元的形式存在于連續中,從而成液滴。這種液滴式的反應腔室具有體積小、樣品間無擴散等優勢。在ddPCR中,利用微滴發...
數字PCR實驗步驟包括:1)試劑配制:將10xdPCRBuffer、dPCR酶、引物和探針、無核酸酶水混合成dPCR預混液,并分裝到8聯排管中或96孔板中;將各待測樣本的核酸模板、陽性對照、陰性對照分別加入相應的8聯排管中或96孔板中;2)芯片進樣:在小海龜B...
企業宗旨:成為數字PCR的,更好地服務于體外診斷行業,讓檢測更簡單!企業價值觀:用戶,質量為本;潛力而為,主動開拓;高效執行,負責到底。發展歷程:2016年,企業成立2017年,數字PCR系統研制成功2018年,產品線成熟2019年,生產線建成“讓檢測,更簡單...
20世紀末,Vogelstein等提出數字PCR(digitalPCR,dPCR)的概念,通過將一個樣本分成幾十到幾萬份,分配到不同的反應單元,每個單元至少包含一個拷貝的目標分子(DNA模板),在每個反應單元中分別對目標分子進行PCR擴增,擴增結束后對各個反應...
在定量PCR時,我們常常糾結一個問題,究竟是相對定量還是***定量呢?如今,你無需糾結了,因為數字PCR(digitalPCR)來了。盡管這兩種技術有些類似,都是估計起始樣品中的核酸量,但它們有一個重要的區別。定量PCR是依靠標準曲線或參照基因來測定核酸量,而...
數字PCR的引物和探針設計規則同熒光定量PCR是類似的,具體規則如下:1、查找和選擇目標序列設計引物和探針的第一步是得到感興趣基因的核酸序列。找到基因保守區域:基因的保守區域是指來自同一屬/種/亞型的、在某個基因上堿基序列差別很小或沒有差別的區域。根據需要,使...
在PCR進行的過程中,首先是引物和探針分別結合,然后開始擴增。如果一個微滴當中有目標基因的片段,Taqman探針就會被酶切碎,熒光基團和淬滅基團分離。在后面的檢測過程中,熒光基團被激發光路激發之后就會發熒光。如果沒有,Taqman探針就不會被切碎,在后面的檢測...
由于現有的商業化數字PCR設備在物理上只設置了2個檢測通道,所以存在一個明顯的短板:不能同時進行多個位點的檢測。在樣品多位點的檢測中,就需要更多的起始樣品,但臨床上組織的樣品非常有限。相比之下熒光定量PCR儀上就很容易實現多重檢測。為了考察利用數字PCR實現多...
染料法是指在qPCR反應體系中加入一種與雙鏈DNA分子結合的熒光染料,包括SYBR?Green I、BEBO和LC Green TMI等染料,它們可以與雙鏈DNA(double strands DNA,dsDNA)的小溝非特異性結合,激發較強的熒光產生。經熒光...
相對定量實驗方法包括兩種重要方法:ΔΔCT Method:使用內參基因定量所研究樣品和參照樣品的目的基因。內參基因與目的基因可以同時反應,也可以單獨反應;雙標準曲線法:對每個樣品的內參基因和目的基因都做定量,求出每個樣品中內參基因和目的基因的數量,然后根據相對...
qpcr的檢測原理:qPCR主要是使用插入染料或熒光探針(例如TaqMan),利用實時積累的熒光信號監測整個擴增過程,然后通過標準曲線來對未知模板進行定量分析。qPCR 主要是依賴于標準品制備標準曲線,進而去確定未知樣品的濃度,因此是一種相對定量的方法。隨著P...
而在指數增長期,由于底物充足,聚合酶活性高,反應產物以指數形式積累,且與初始模板量存在定量關系,因此,在該時期對模板起始量進行定量分析準確且重復性比較好。Ct值,是在指數增長期內,熒光信號到達熒光檢測閾值時所經歷的循環數,其中C循環(Cycle),t閾值(th...
SYBR Green I染料試劑:SYBR Green I染料法采用了Applied Biosystems SYBR Green I染料,一種可以在PCR循環過程中隨著PCR產物的累計而對其進行檢測的高度特異性雙鏈DNA結合染料。TaqMan和SYBR Gre...
所謂實時熒光定量PCR技術,是指在PCR反應體系中加入熒光基團,利用熒光信號積累實時監測整個PCR進程,通過標準曲線對未知模板進行定量分析的方法。實時熒光定量PCR (Quantitative Real-time PCR)是一種在DNA擴增反應中,以熒光化學物...
免疫沉淀——捕獲并分離蛋白質-DNA復合物使用抗體捕獲蛋白質-DNA復合物中的目標蛋白質是實驗成功的關鍵因素。抗體免疫沉淀并從細胞核組分中分離蛋白質,去除不相關的細胞物質。使用抗體結合磁珠完成所得抗體-蛋白質-DNA復合物的純化。經過孵育后,充分洗滌磁珠-抗體...