待測細胞被制備成單細胞懸液,經特異性熒光染料染色后置于專門樣品管中,在氣體壓力推動下被壓入流動室,流動室內充滿鞘液(不含細胞或微粒的緩沖液),在高壓作用下從鞘液管噴出包裹細胞,使細胞排成單列形成細胞液柱,依次通過檢測區。液柱與高度聚焦的激光束垂直相交,被熒光染料染色的細胞受到激光激發產生熒光信號和散射光信號,這些光信號通過波長選擇的濾光片,由相應的光電管和電子檢測器接收并轉換成電信號,經放大器放大后送入計算機并進行分析顯示和結果輸出,測定的結果常用單參數直方圖、雙參數散點圖、輪廓(等高)圖和三維立體圖來表示。流式細胞術的檢測結果:精度高、準確性好;可對目標細胞進行分選。珠三角高精確性倍性分析儀系統
流式細胞儀是對細胞進行自動分析和分選的裝置。它可以快速測量、存貯、顯示懸浮在液體中的分散細胞的一系列重要的生物物理、生物化學方面的特征參量,并可以根據預選的參量范圍把指定的細胞亞群從中分選出來。多數流式細胞計是一種零分辨率的儀器,它只能測量一個細胞的諸如總核酸量,總蛋白量等指標,而不能鑒別和測出某一特定部位的核酸或蛋白的多少。也就是說,它的細節 分辨率為零。待測樣品(如細胞、微球、精子或細菌等)被制成單細胞懸液,在一定壓力下被鞘液包裹著形成單列的細胞進入流動室,并與激光束相交。細胞被激光激發后產生散射光和熒光,經光電轉換器處理后變為電信號,在電腦上以數字信號的形式展現出來。中國CyFlow Ploidy Analyzer倍性分析儀DNA熒光染料CyFlow Analyser倍性分析儀的特點:1、方便快捷2、多功能性3、高精確性4、靈活便捷5、獨特的儀器設計;
CyFlow Ploidy Analyser Demo倍性分析儀實驗總結:1、CyFlow Ploidy Analyser Demo 實 驗結 果 很 好 , DAPI 通道 的CV<2%。2. Sysmex-Partec CyStain® UV Precise P試劑盒效果非常好,非常適合對擬南芥、油菜、大蒜、龍葵、糜子、小麥等植物的倍性檢測。3. CyFlow Ploidy Analyser配合試劑盒,非常適合植物倍性檢測,兩分鐘內即可出結果,縮短了實驗周期。CyFlow Ploidy Analyser Demo倍性分析儀專為倍性設計,全球先進原裝試劑,2分鐘完成倍性檢測倍性,檢測金標準,海量文獻支持。
使用熒光核酸染料標記植物中DNA含量,隨后用流式細胞儀高通量進行植物倍性分析,已經成為植物研究中的常用分析手段[1]。相較傳統的根尖壓片染色體計數,流式細胞法制備樣本簡單,無需制備中期染色體,通量高,結果準確,并且可以兼容幾乎所有植物的任何組織。使用Sysmex-Partec原廠倍性分析試劑和CellTrics過濾器,只需要:1、切碎2、過濾3、上機三步,2分鐘內完成倍性分析實驗。使用Sysmex-Partec CyFlow PA對植株基因組大小進行預測,染色體倍性進行預測,對突變株進行倍性鑒定,構建植物進化樹。流式細胞儀主要由流動室及液流系統、激光器及光學系統、光電管及檢測系統、計算機及分析系統組成。
樣品上樣到儀器 典型的實驗從單細胞懸浮液中的熒光標記細胞開始,但是可以使用任何顆粒類型的樣品。將樣品置于流式細胞儀上,樣品被吸到儀器中,細胞懸浮在一種被稱為鞘液的生理緩沖液。流體系統(管道、泵和閥)將初始樣品懸浮液排列成單列細胞流,并使細胞通過流式細胞儀以進行分析。流式細胞儀的流體學。流動池(也稱為流式小室)使樣品中的細胞(顆粒)排成一列。這是單細胞分析的關鍵步驟。激光檢測點 細胞與激光發生相互作用的地方稱為激光檢測點。您也可能聽過它的另一個名字“激光攔截”。這是熒光檢測發生的地方。當激光束照射到單個細胞時,一些光會撞到細胞內的物理結構,導致光線散射。這種光散射可被測量,并且與相對細胞大小和細胞內的結構相關。這些測量稱為前向角散射(FSC)和側角散射(SSC),取決于收集光的位置相對于激光路徑的角度。幾乎同時,來自激光器的光激發與細胞相關的所有熒光團,產生熒光發射。所有這些光被檢測器收集并通過流式細胞儀的電子元件進行處理。通過激光檢測點之后,流體系統會將不需要的細胞輸送到廢液桶中。在細胞分選儀中,細胞將在激光檢測點被分選和輸送到收集管中,以供后續實驗使用。簡單的流式細胞儀可用于檢測細胞特征,包括細胞大小、細胞數量、細胞周期和細胞表型分析等。進口配備532nm光源倍性分析儀CyFlow分選系統
倍性分析儀是檢測動植物倍性較好的機器。珠三角高精確性倍性分析儀系統
流式細胞術的特點:1、檢測對象:單細胞懸液或生物顆粒;2、檢測特點:單細胞水平分析;3、檢測參數:多參數熒光信號;4、檢測速度:高速,比較高達上萬個細胞/秒;5、檢測結果:精度高、準確性好;可以對目標細胞進行分選。分析型流式細胞儀:細胞樣本分析后再進入廢液桶,不能回收利用。分選型流式細胞儀:既能流式分析,還能對分析的目的細胞進行分選。進樣管道比較長,還需要保持無菌狀態,所以分選型流式細胞儀一般只用于分選。珠三角高精確性倍性分析儀系統
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