翻譯后修飾蛋白組:翻譯后修飾蛋白組分析是指在組學水平上對存在翻譯后修飾的蛋白質進行分析。翻譯后修飾蛋白組是指細胞或組織等整體水平上的翻譯后修飾蛋白。蛋白質的翻譯后修飾(Post Translational Modifications, PTMs)是蛋白質在翻譯中或翻譯后經歷的一個共價加工過程。蛋白翻譯后修飾通過在一個或多個氨基酸殘基上加修飾基團或通過蛋白質水解去基團而改變蛋白質的性質,調節蛋白質的功能。經過翻譯后修飾的蛋白質稱為翻譯后修飾蛋白。目前,已知的蛋白質翻譯后修飾主要包括糖基化、磷酸化、乙酰化、泛素化、二硫鍵配對、甲基化和亞硝基化等等。蛋白質翻譯后修飾可以改變蛋白質的物理、化學性質。湖...
乙酰化修飾蛋白質組學分析:乙酰化修飾蛋白質組學分析是指從蛋白質組學的水平分析蛋白質乙酰化修飾,包括乙酰化蛋白質的鑒定和定量。提供基于質譜的乙酰化蛋白組研究服務。蛋白質乙酰化包括組蛋白乙酰化和非組蛋白乙酰化。組蛋白乙酰化主要是賴氨酸乙酰化,已在基因轉錄調控作用方面被普遍的研究。非組蛋白乙酰化構成了哺乳動物細胞中乙酰化蛋白的主要部分,參與了所有主要生物過程,包括蛋白質的定位、轉移、功能和降解,遺傳物質的轉錄和復制等。除了重要的生物學功能以外,乙酰化蛋白質及其調控酶還與衰老和多種疾病(如神經變形紊亂、心血管疾病等)緊密相關。因此,對乙酰化修飾蛋白質組進行研究有助于進一步探索細胞的生命活動與了解相關疾...
乙酰化修飾蛋白質組學分析:乙酰化修飾蛋白質組學分析是指從蛋白質組學的水平分析蛋白質乙酰化修飾,包括乙酰化蛋白質的鑒定和定量。提供基于質譜的乙酰化蛋白組研究服務。蛋白質乙酰化包括組蛋白乙酰化和非組蛋白乙酰化。組蛋白乙酰化主要是賴氨酸乙酰化,已在基因轉錄調控作用方面被普遍的研究。非組蛋白乙酰化構成了哺乳動物細胞中乙酰化蛋白的主要部分,參與了所有主要生物過程,包括蛋白質的定位、轉移、功能和降解,遺傳物質的轉錄和復制等。除了重要的生物學功能以外,乙酰化蛋白質及其調控酶還與衰老和多種疾病(如神經變形紊亂、心血管疾病等)緊密相關。因此,對乙酰化修飾蛋白質組進行研究有助于進一步探索細胞的生命活動與了解相關疾...
翻譯后修飾蛋白的檢測方法:翻譯后修飾蛋白的檢測技術包括有免疫沉淀、western blot、質譜技術、體外生化分析等。其中,免疫沉淀是大多數翻譯后修飾檢測中的關鍵步驟,它利用蛋白特異性抗體或某種翻譯后修飾的特異性抗體來富集目標蛋白,之后再用western blot或質譜技術分析目標蛋白。Western blot和質譜技術均可用于蛋白質翻譯后修飾的下游檢測,其中Western blot相對簡單但依賴于特異性抗體且無法識別單個蛋白質變化,質譜則可以檢測包括未知PTM在內的幾乎所有的PTMs但成本更高需要專業知識來分析產生的大量數據。研究人員可以根據成本、有無可用抗體,以及有沒有目標等選擇合適的方法...
質譜分析蛋白翻譯后修飾原理:相較于沒有發生翻譯后修飾的蛋白,翻譯后修飾蛋白會在特定肽段序列有分子量的增加。在蛋白翻譯后修飾方式的質譜分析過程中,蛋白會首先被酶切成肽段,然后進入質譜進行分析;通過質譜分析,得到的是一系列肽段的相對分子質量信息。對于某一個特定的肽段而言,在沒有發生任何翻譯后修飾的情況下其序列信息和分子量是確定的,當它發生了某種翻譯后修飾之后,例如磷酸化修飾,因為磷酸根的分子量也是確定的,所以在質譜檢測過程中如果發現部分肽段的分子量剛好增加了一個磷酸根的分子量,則可以假設這個肽段發生了磷酸化修飾,再通過二級或多級質譜的譜圖進行二次確認即可實現翻譯后修飾類型鑒定及修飾位點分析等。蛋白...
蛋白質磷酸化修飾鑒定方法:免疫印跡技術:技術優勢特點。1、 檢測特異性高。2、能夠特異鑒定單個磷酸化位點。同位素標記(Isotope Labeled)結合免疫印跡法:此方法的原理是當蛋白發生磷酸化時,放射性32P的摻入和分子質量變化引起的凝膠遷移(gelshift),再通過免疫印跡方法檢測同位素標記,從而達到鑒定磷酸化蛋白的目的。技術優勢特點:1、檢測技術靈敏并且直觀。2、常用于體外磷酸化反應結果檢測。3、 磷酸化鑒定不受抗體限制。4、可同時分析多個蛋白磷酸化。蛋白質的翻譯后修飾調控著底物的酶活性、功能以及三級結構的變化。廣東亞硝基化修飾蛋白質組學技術服務翻譯后修飾蛋白組學分析:蛋白質組學的研...
蛋白質修飾位點分析:基于LC-MS/MS分析能夠精確測定蛋白質或多肽分子質量這一特性,從而檢測蛋白質或者多肽上位點發生何種修飾。可檢測修飾類型如下: 磷酸化、糖基化、乙酰化、泛素化、丙酰化、丁酰化、丙二酰化、戊二酰化、琥珀酰化、單甲基化、二甲基化、三甲基化。1、磷酸化:信號轉導、細胞周期、生長發育機理等;2、糖基化:蛋白質折疊、更新以及免疫應答等;3、乙酰化:基因表達調控、細胞凋亡、細胞代謝、蛋白質穩定性以及神經退行性的病變等;4、泛素化:細胞周期、細胞凋亡、轉錄調控、DNA修復以及信號轉導等;5、甲基化:染色質結構及轉錄調控等;6、丙酰化 / 丙二酰化 / 戊二酰化 / 琥珀酰化:主要存在于...
蛋白質學組翻譯后修飾分析:組蛋白是一類高度保守的蛋白質,是染色質的關鍵成分,是DNA包裝的結構單位。組蛋白的功能受其翻譯后修飾介導。組蛋白翻譯后修飾包括通過絲氨酸或蘇氨酸殘基的磷酸化,賴氨酸或精氨酸的甲基化,賴氨酸的乙酰化和脫乙酰基,賴氨酸的泛素化和磺酰化等對組蛋白進行的共價修飾。組蛋白這些修飾對于核完整性至關重要,因為它們可以調節染色質結構并募集參與基因調節、DNA修復和染色體濃縮的酶。組蛋白的翻譯后修飾大多位于N末端的尾巴上,因為N末端是蛋白質中比較暴露和比較靈活的區域。分析組蛋白翻譯后修飾有助于探索組蛋白修飾與染色體濃縮、DNA轉錄等生物功能之間的關系。蛋白質翻譯后修飾有什么生物學意義?...
蛋白質乙酰化修飾組學技術:乙酰化修飾是體內保守的可逆轉的蛋白修飾,對細胞核內轉錄調控因子的刺激有著重要的作用。此外,還存在的非組蛋白乙酰化修飾參與了代謝通路及代謝酶活性的調節。采用肽段預分離降低高豐度組蛋白對蛋白乙酰化鑒定的影響,再結合免疫共沉淀通過抗體富集乙酰化的肽段,從而實現乙酰化的鑒定及定量。樣品要求:1、SDS-PAGE條帶:5個以上可見考染條帶。2、溶液(目標蛋白質):目標蛋白總量>50μg,目標蛋白濃度>80%。3、溶液(大規模混合蛋白質):蛋白總量>1mg,蛋白濃度>1μg/μl。通過蛋白質翻譯后修飾也進一步增加了細胞通路機制和生命活動的多樣性和復雜性。山東蛋白質磷酸化修飾組學價...
蛋白質磷酸化修飾組學技術優點:1、全方面性:磷酸化蛋白質組學以整個細胞蛋白為研究對象,研究內容包括了細胞內具有生命功能的蛋白,如細胞增生、細胞分裂和細胞分化等相關蛋白,因而研究更為全方面。2、可靠性:傳統的生物學研究蛋白質磷酸化往往針對特定條件,以兩個蛋白或更多蛋白之間的相互作用為出發點,具有局限性,缺乏整體認識。磷酸化蛋白質組學則可檢測不同蛋白激酶及磷酸化酶對同一個蛋白磷酸化程度的影響,因而結果具有普遍性和可靠性。3、有效性:磷酸化蛋白質組學反映的是細胞內真實發生的事件,在一次試驗中考慮了不同變量,克服了生物學中逐步添加變量的缺陷。4、探索性:磷酸化蛋白質組學以細胞內蛋白為研究對象,相對于傳...
什么是蛋白質的翻譯后修飾?蛋白質的翻譯后修飾(post-translational-modification-analysis.html)是指蛋白質在翻譯后的化學修飾。對于大部分的蛋白質來說,這是蛋白質生物合成的較后步驟。PTM是細胞信號傳導中的重要組成部分。通過向修飾基團添加一個或多個氨基酸殘基或通過蛋白質水解切割該基團來改變蛋白質的性質,是蛋白質生物學功能表達的重要步驟。生物蛋白質的翻譯后修飾極大地增加了蛋白質結構的類型和功能。這個過程調節細胞周期和蛋白質轉錄,并影響表觀遺傳學。蛋白質有哪些翻譯后修飾?貴州蛋白質磷酸化修飾組學研究蛋白質糖基化修飾組學技術:糖基化是在酶的控制下,蛋白質或脂質...
蛋白質磷酸化修飾鑒定方法:免疫印跡技術:技術優勢特點。1、 檢測特異性高。2、能夠特異鑒定單個磷酸化位點。同位素標記(Isotope Labeled)結合免疫印跡法:此方法的原理是當蛋白發生磷酸化時,放射性32P的摻入和分子質量變化引起的凝膠遷移(gelshift),再通過免疫印跡方法檢測同位素標記,從而達到鑒定磷酸化蛋白的目的。技術優勢特點:1、檢測技術靈敏并且直觀。2、常用于體外磷酸化反應結果檢測。3、 磷酸化鑒定不受抗體限制。4、可同時分析多個蛋白磷酸化。乙酰化修飾是體內保守的可逆轉的蛋白修飾。浙江蛋白質亞硝基化修飾組學服務蛋白質翻譯后修飾在蛋白質中磷酸化位點分析時應該注意些什么問題?覆...
翻譯后修飾蛋白組學分析:在蛋白翻譯后修飾方式的鑒定過程中,蛋白會首先被酶切成肽段,然后進入質譜進行分析。通過質譜分析,得到的是一系列肽段的分子質量信息。對于某一個特定肽段而言,在沒有發生任何翻譯后修飾的情況下,其序列信息和分子量是確定的。當它發生了某種翻譯后修飾之后,例如磷酸化修飾,由于序列信息和分子量是確定的,磷酸根的分子量也是確定的。在質譜檢測過程中發現其中的部分肽段的分子量剛好增加了一個磷酸根的分子量,假設這個肽段就發生了磷酸化修飾,再通過二級質譜圖進行二次確認。蛋白質翻譯后修飾可以改變蛋白質的物理、化學性質。南京棕櫚酰化修飾蛋白質組學分析價格蛋白質修飾位點分析:基于LC-MS/MS分析...
蛋白磷酸化修飾過程:蛋白磷酸化修飾這一過程是通過蛋白激酶催化,將磷酸基團從ATP轉移到多肽底物的絲氨酸、蘇氨酸,或酪氨酸殘基上。并且磷酸化修飾的過程是可逆的,去磷酸化反應由蛋白磷酸酶催化完成。蛋白磷酸化檢測方法:Western Blot檢測方法:Western Blot是檢測蛋白磷酸化水平的常用方法,主要過程為先利用SDS-PAGE分離蛋白質,隨后將蛋白質轉移到PVDF膜上,然后使用特異性識別磷酸化蛋白的抗體來鑒定目標蛋白的磷酸化水平。只有被磷酸化修飾的蛋白才會在相應分子質量的地方顯現特異性蛋白條帶。蛋白質翻譯后修飾可以改變蛋白質的物理、化學性質。蛋白質氧化修飾組學質譜鑒定蛋白質翻譯后修飾的檢...
蛋白質學組翻譯后修飾分析:組蛋白是一類高度保守的蛋白質,是染色質的關鍵成分,是DNA包裝的結構單位。組蛋白的功能受其翻譯后修飾介導。組蛋白翻譯后修飾包括通過絲氨酸或蘇氨酸殘基的磷酸化,賴氨酸或精氨酸的甲基化,賴氨酸的乙酰化和脫乙酰基,賴氨酸的泛素化和磺酰化等對組蛋白進行的共價修飾。組蛋白這些修飾對于核完整性至關重要,因為它們可以調節染色質結構并募集參與基因調節、DNA修復和染色體濃縮的酶。組蛋白的翻譯后修飾大多位于N末端的尾巴上,因為N末端是蛋白質中比較暴露和比較靈活的區域。分析組蛋白翻譯后修飾有助于探索組蛋白修飾與染色體濃縮、DNA轉錄等生物功能之間的關系。蛋白質翻譯后修飾的作用主要是改變蛋...
蛋白質學組翻譯后修飾分析自中而下分析策略:自中而下的蛋白質組學技術可用于組蛋白修飾的分析。樣品制備與普遍使用的自下而上的分析策略相同,直到得到純化的組蛋白。提取組蛋白后,用GluC進行消化。然后用弱陽離子交換/親水相互作用色譜(WCX-HILIC)與配備電子轉移解離(ETD)的高分辨率質譜聯機聯用,對樣品進行理想的分離。譜識別可以用傳統的軟件進行,但是由于估計適當的錯誤發現率的問題,需要對結果進行過濾。自上而下的技術可以直接引入完整的蛋白質并在串聯質譜儀上對其進行片段化,不需要蛋白質水解消化。目前,有兩種完全分離蛋白質的方法:離線和在線。前者用四維分離法,后者用WCX-HILIC。蛋白質翻譯后...
蛋白質乙酰化修飾組學定量分析:1. SILAC細胞標記,組織/細胞破碎,提取、提純目的蛋白質(基于SILAC的乙酰化修飾組學定量)。2. 使用胰蛋白酶將目的蛋白酶解成多肽片段。3. 對多肽片段進行iTRAQ標記(基于iTRAQ的乙酰化修飾組學定量)。4. 使用高效特異性乙酰化抗體對乙酰化修飾肽段進行免疫富集。5. 使用LC-MS/MS對富集的乙酰化肽段進行序列分析。6. 數據分析,比對不同樣本中蛋白乙酰化修飾水平差異,并對產生變化的生物學意義進行解釋。蛋白質修飾可檢測修飾類型有磷酸化、糖基化、乙酰化、泛素化、丙酰化、丁酰化、丙二酰化。北京泛素化修飾蛋白質組學主要方式蛋白質翻譯后修飾:蛋白質的翻...
蛋白質學組翻譯后修飾分析:組蛋白是一類高度保守的蛋白質,是染色質的關鍵成分,是DNA包裝的結構單位。組蛋白的功能受其翻譯后修飾介導。組蛋白翻譯后修飾包括通過絲氨酸或蘇氨酸殘基的磷酸化,賴氨酸或精氨酸的甲基化,賴氨酸的乙酰化和脫乙酰基,賴氨酸的泛素化和磺酰化等對組蛋白進行的共價修飾。組蛋白這些修飾對于核完整性至關重要,因為它們可以調節染色質結構并募集參與基因調節、DNA修復和染色體濃縮的酶。組蛋白的翻譯后修飾大多位于N末端的尾巴上,因為N末端是蛋白質中比較暴露和比較靈活的區域。分析組蛋白翻譯后修飾有助于探索組蛋白修飾與染色體濃縮、DNA轉錄等生物功能之間的關系。常見的蛋白質翻譯后修飾包括糖基化。...
蛋白質有哪些翻譯后修飾?作用機制和生物學功能是什么?前體蛋白是沒有活性的,常常要進行一個系列的翻譯后加工,才能成為具有功能的成熟蛋白。加工的類型是多種多樣的,一般分為以下幾種:N-端fMet或Met的切除、二硫鍵的形成、化學修飾和剪切。當合成蛋白質時,20種不同的氨基酸會組合成為蛋白質。蛋白質的翻譯后蛋白質其他的生物化學官能團(如醋酸鹽、磷酸鹽、不同的脂類及碳水化合物)會附在蛋白質上從而改變蛋白質的化學性質,或是造成結構的改變(如建立雙硫鍵),來擴闊蛋白質的功能。再者,酶可以從蛋白質的N末端移除氨基酸,或從中間將肽鏈剪開。舉例來說,胰島素它會在建立雙硫鍵后被剪開兩次,并在鏈的中間移走多肽前體,...
翻譯后修飾蛋白組分析:蛋白質翻譯后修飾是影響蛋白質功能并調節整個細胞過程的重要方式,幾乎在每個細胞過程中都是不可或缺的。分析和鑒定翻譯后修飾蛋白質對揭示蛋白質的功能和深入了解各種生理現象具有重要意義。大多數翻譯后修飾蛋白以低化學計量和豐度存在,這限制了在分析全細胞裂解液時對其的檢測。因此,要在蛋白質組學的范圍內表征翻譯后修飾蛋白,純化方法是必要的,以分離修飾蛋白和肽段,然后再進行后續分析。后續分析一般采用質譜技術進行,可以對翻譯后修飾蛋白組進行定性和定量研究。蛋白質糖基化指碳水化合物通過共翻譯或翻譯后修飾的方式附著到蛋白質上的過程。上海蛋白質丙二酰化修飾組學領域蛋白質翻譯后修飾組學:翻譯后修飾...
質譜分析蛋白翻譯后修飾原理:相較于沒有發生翻譯后修飾的蛋白,翻譯后修飾蛋白會在特定肽段序列有分子量的增加。在蛋白翻譯后修飾方式的質譜分析過程中,蛋白會首先被酶切成肽段,然后進入質譜進行分析;通過質譜分析,得到的是一系列肽段的相對分子質量信息。對于某一個特定的肽段而言,在沒有發生任何翻譯后修飾的情況下其序列信息和分子量是確定的,當它發生了某種翻譯后修飾之后,例如磷酸化修飾,因為磷酸根的分子量也是確定的,所以在質譜檢測過程中如果發現部分肽段的分子量剛好增加了一個磷酸根的分子量,則可以假設這個肽段發生了磷酸化修飾,再通過二級或多級質譜的譜圖進行二次確認即可實現翻譯后修飾類型鑒定及修飾位點分析等。泛素...
蛋白質翻譯后修飾組學:蛋白質翻譯后修飾(Post-translational modification, PTM)是指對翻譯后的蛋白質進行共價加工的過程。它通過在一個或多個氨基酸殘基加上修飾基團,可以改變蛋白質的物理、化學性質,進而影響蛋白質的空間構象和活性狀態、亞細胞定位、折疊及其穩定性以及蛋白質-蛋白質相互作用。蛋白質翻譯后修飾的豐度變化在生命活動研究中具有重大意義,異常的翻譯后修飾會導致多種疾病的發生。質譜可以分辨蛋白質修飾前和修飾后分子量上的變化,因此只要知道靶蛋白翻譯后修飾前后分子量的變化,就能對翻譯后修飾方式進行鑒定和定量。蛋白質磷酸化修飾組學具有有效性。江蘇蛋白質泛素化修飾組學蛋...
蛋白質學組翻譯后修飾的類型:翻譯后修飾的類型包括N端fMet或Met的去除、二硫鍵的形成、化學修飾和肽鍵的裂解,其中磷酸化是比較常見的。蛋白質的化學修飾反應是在維持蛋白質的完整性和功能性的基礎上,通過基于其氨基酸殘基的化學反應獲得新的生物結合物。翻譯后修飾在哪里發生?翻譯后修飾主要發生在氨基酸側鏈或蛋白質的C端或N端。現有的官能團或新官能團的引入可被用于修飾蛋白質,以擴展20個標準氨基酸的化學組成。翻譯后修飾的位點通常帶有可以在化學反應中充當親核試劑的官能團,如絲氨酸、蘇氨酸和酪氨酸的羥基;賴氨酸、精氨酸和組氨酸胺形式;同時,在蛋白質的N端和C端,天冬酰胺也可作為翻譯后修飾中的一種聚糖連接點。...
蛋白翻譯后修飾組學技術在準確醫學中的應用:盡管目前大數據的獲得會采用基因組學和轉錄組學,但是關鍵的發現還是依賴蛋白質組數據而得到的。近來越來越多的研究表明蛋白組學驅動的準確的醫學具有極大的實用性和普適性,蛋白組學的研究更加速了臨床轉化的進程。蛋白翻譯后修飾(post-ranslational modification, PTM)賦予了蛋白種類的豐富性及蛋白功能的多樣化,研究蛋白翻譯后修飾不只可以確定蛋白修飾(磷酸化、泛素化、酰化、甲基化、SUMO化等)或蛋白酶裂解的新位點,還可以發現生物標記物及探索藥物/化學調節物的作用機制。蛋白質磷酸化修飾組學具有全方面性。廣東蛋白質亞硝基化修飾組學領域翻譯...
蛋白翻譯后修飾檢測:由于PTMs在基礎生物學以及疾病發病機理中的重要性,因此非常需要對蛋白質的翻譯后修飾進行檢測。對蛋白翻譯后修飾進行研究時通常需要富集步驟,因為這些翻譯后修飾的蛋白質相對含量較低。大多數PTMs的檢測方法與富集策略結合在一起開發,以提供比較好的機會來識別、驗證和研究蛋白翻譯后修飾的功能。但是,在檢測已有特異性翻譯后修飾抗體的修飾蛋白質時,可能不需要富集步驟。質譜技術,通過測定肽段的分子量可以對該肽段的翻譯后修飾情況進行檢測,并可以對翻譯后修飾蛋白進行定性和定量分析。在眾多乙酰化修飾的蛋白質中,研究較多的要數細胞核中包圍DNA的組蛋白了。貴州乙酰化修飾蛋白質組學分析價格蛋白質磷...
蛋白質乙酰化修飾組學定量分析:1. SILAC細胞標記,組織/細胞破碎,提取、提純目的蛋白質(基于SILAC的乙酰化修飾組學定量)。2. 使用胰蛋白酶將目的蛋白酶解成多肽片段。3. 對多肽片段進行iTRAQ標記(基于iTRAQ的乙酰化修飾組學定量)。4. 使用高效特異性乙酰化抗體對乙酰化修飾肽段進行免疫富集。5. 使用LC-MS/MS對富集的乙酰化肽段進行序列分析。6. 數據分析,比對不同樣本中蛋白乙酰化修飾水平差異,并對產生變化的生物學意義進行解釋。蛋白質翻譯后修飾有什么生物學意義?湖北乙酰化修飾蛋白質組學鑒定乙酰化修飾蛋白質組學分析:乙酰化修飾蛋白質組學分析是指從蛋白質組學的水平分析蛋白質...
質譜分析乙酰化蛋白質組:質譜分析技術可以對蛋白質組中的乙酰化蛋白進行鑒定、乙酰化位點定位以及定量。當質譜用于乙酰化定量蛋白組研究中時,因為乙酰化蛋白質在生物樣本中含量低、動態范圍廣,需要先對乙酰化肽段進行富集,然后再對富集得到的乙酰化肽段樣品進行定量分析。質譜定量乙酰化蛋白組采用肽段預分離降低高豐度蛋白的影響,結合免疫共沉淀通過高效的抗體富集乙酰化的肽段,從而實現大規模乙酰化的鑒定及定量。為了鑒定和定量更多的乙酰化肽段,在酶切過程中還可使用多種不同的酶對蛋白樣品進行酶切。蛋白質磷酸化修飾組學具有探索性。貴陽蛋白質糖基化修飾組學一般流程蛋白質-蛋白質相互作用是蛋白質發揮功能的主要機制之一,在DN...
翻譯后修飾蛋白組:翻譯后修飾蛋白組分析是指在組學水平上對存在翻譯后修飾的蛋白質進行分析。翻譯后修飾蛋白組是指細胞或組織等整體水平上的翻譯后修飾蛋白。蛋白質的翻譯后修飾(Post Translational Modifications, PTMs)是蛋白質在翻譯中或翻譯后經歷的一個共價加工過程。蛋白翻譯后修飾通過在一個或多個氨基酸殘基上加修飾基團或通過蛋白質水解去基團而改變蛋白質的性質,調節蛋白質的功能。經過翻譯后修飾的蛋白質稱為翻譯后修飾蛋白。目前,已知的蛋白質翻譯后修飾主要包括糖基化、磷酸化、乙酰化、泛素化、二硫鍵配對、甲基化和亞硝基化等等。常見的蛋白質翻譯后修飾包括泛素化。山東蛋白質翻譯后...
質譜分析乙酰化蛋白質組:質譜分析技術可以對蛋白質組中的乙酰化蛋白進行鑒定、乙酰化位點定位以及定量。當質譜用于乙酰化定量蛋白組研究中時,因為乙酰化蛋白質在生物樣本中含量低、動態范圍廣,需要先對乙酰化肽段進行富集,然后再對富集得到的乙酰化肽段樣品進行定量分析。質譜定量乙酰化蛋白組采用肽段預分離降低高豐度蛋白的影響,結合免疫共沉淀通過高效的抗體富集乙酰化的肽段,從而實現大規模乙酰化的鑒定及定量。為了鑒定和定量更多的乙酰化肽段,在酶切過程中還可使用多種不同的酶對蛋白樣品進行酶切。蛋白磷酸化修飾過程是通過蛋白激酶催化,將磷酸基團從ATP轉移到多肽底物的絲氨酸、或酪氨酸殘基上。貴陽氧化修飾蛋白質組學主要技...
蛋白質翻譯后修飾在蛋白質中磷酸化位點分析時應該注意些什么問題?覆蓋率:覆蓋率越高,檢測和鑒定含有修飾基團的肽幾率就越大。修飾位點的占有率:被修飾的蛋白質的百分比低,則檢測到修飾肽的機會會隨之減少。如果百分比較高(> 30%),則有助于識別修飾位點。棕櫚酰化蛋白修飾質譜鑒定方法:S-棕櫚酰化的主要功能是促進蛋白質與細胞膜的結合。蛋白質可以由一個棕櫚酰基組成,也可以與更多棕櫚基或與其他脂質,如豆蔻酰基。由于對S-棕櫚酰化蛋白分析仍然具有挑戰性,由于S-棕櫚酰化修飾蛋白亞水平以及疏水性和潛在不穩定的硫代質鏈的S-脂酰化肽。現在常用的幾種方法可以捕獲S-脂酰化蛋白以及對目標修飾蛋白進行捕獲。蛋白質磷酸...