芯棄疾JX-8B數字ELISA產品
每個生物實驗室都用得起的單分子免疫檢測
動力學上,對于200,000個微球分散在100μL中,珠子之間的平均距離約為80μm。大小為TNF-α和PSA(分別為17.3和30kDa)的蛋白質將在不到1min的時間內擴散80μm。表明,在2小時的孵育過程中,蛋白質分子的捕獲不會受到限制動力學上。其次,必須有足夠的珠子被加載到陣列上以限制泊松噪聲。200,000個珠子加載到50,000孔陣列中,通常會導致20,000–30,000個微球被困在1mL孔中。對于典型的背景信號為1%活性微球(見下文),這種裝載導致背景信號為200-300個活性微球檢測到,對應于泊松噪聲的可接受變異系數(CV)為6-7%。第三,過高的微球濃度可能導致:a)非特異性結合增加,降低信噪比;以及b)分析物與微球的比例過低,導致活性微球的比例過低,從而導致泊松噪聲引起的高CV。這些因素的平衡NatBiotechnol.作者手稿;可在PMC2010年12月1日獲得。Rissin等人第5頁因素意味著每100μLoftest樣品含有20萬到100萬顆珠子是比較好的數字ELISA。同時,為了獲得可接受的背景信號(1%)和泊松噪聲)。 數字 ELISA 芯片采用高透光基底與表面涂層,減少非特異性吸附,提升磁珠捕獲效率。創新性數字ELISA使用效果
芯棄疾JX-8B數字ELISA產品每個生物實驗室都用得起的單分子免疫檢測我們的方法利用了亞飛克爾反應室陣列(圖1C)我們稱之為單分子陣列(SiMoA)——可以分離和檢測單個酶分子20-24。這種方法借鑒了Walt等人20-23的工作陣列用于研究單個酶的動力學和抑制作用。我們的目標是利用捕獲和檢測單個酶的能力來檢測用酶標記的單個蛋白質分子。在這個單分子免疫測定的第一步(圖1A),在微球(直徑μm)上形成一個三明治抗體復合物,結合的復合物用酶標記,如同常規的基于微球的ELISA。當測定含有極低濃度蛋白質的樣品,蛋白質的比值分子(以及由此產生的酶標記復合物)與微球的比例很?。ㄍǔP∮?:1),因此含有標記免疫復合物的微球百分比遵循泊松分布,導致單個微球上存在單一免疫復合物。例如,如果在(3000個分子)的蛋白質中捕獲并標記了50μM的蛋白質,并且在200,000個微球上進行標記,則珠子,然后,。無法檢測到這些低數量的酶使用標準檢測技術(例如,平板閱讀器)的標簽,因為熒光染料由每種酶生成的產物擴散到一個大卵試驗體積(通常為),并進入其中需要數十萬種酶標簽才能產生高于該水平的熒光信號背景。 芯棄疾單分子數字ELISA極速單分子POCT產品-數字化ELISA芯片,幫您數字化高靈敏檢測,且微量樣本多重指標檢測;
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數字化高敏ELISA芯片,低成本、便捷、快速進行微量樣本的檢測:1)微量樣本即可檢測;微量樣本、微量試劑檢測:流道高度只有幾十微米,是原來微孔板高度的幾十分之一,可有效節省樣本量、試劑量;常規檢測比較低只需要10ul樣本即可進行完整檢測。2)單個樣本可以同時進行多指標的檢測多重指標檢測:單個樣本,同時進行2-4個指標檢測,可定制更多指標;芯片單孔同時檢測2個指標芯片單孔同時檢測4個指標3)靈活多通道檢測:可以手動完成,主要在芯片上進行,對儀器不依賴(只需要移液槍和現成的熒光顯微鏡,即可實現檢測),更小單元可做4-8個樣本檢測;初始的嘗試成本極低(活動期8孔芯片只需要200元即可測試實驗);相比普通ELISA試劑盒,更少96孔板價格2-4千元,每個檢測孔20-40元;4)數字化的檢測方式和檢測結果;檢測反應基底為陣列化、單分散排列的磁珠,可使用熒光顯微鏡進行可視化的免疫檢測,原來的ELISA信號,轉化成0或1,每個磁珠是否參與反應,反應效率如何。
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每個生物實驗室都用得起的單分子免疫檢測
珠子以兩種不同的方式讀出。首先,在與100μMresorufin-阝-D孵育1小時后,用熒光板讀出器以100μL方式讀出珠子結合-半乳糖苷(RGP),一種熒光底物for阝-半乳糖苷酶。在平板閱讀器上,檢測限為15fMofS阝G(圖2)。其次,將珠子加載然后將RGP溶液密封到陣列的孔中,單個酶的信號被允許在反應室中積累,并每30秒獲取一次熒光圖像。實驗結束時獲取陣列的白光圖像以識別含有珠子的孔(含有珠子的孔散射光與空井不同)。熒光圖像用于確定哪些微球具有相關的結合酶(從時間變化的熒光圖像中強度增加)。圖2顯示了微球中含酶的比例與總體S阝G濃度的關系的對數-對數圖。檢測到的比較低酶偶聯物濃度為350飛摩爾(zM),并通過外推信號等于的酶濃度計算得出的檢測限(LOD)。 芯棄疾JX-8B數字ELISA,超敏檢測,理論可達飛克級;
多指標高通量數字ELISA芯片:微量樣本多重檢測的理想方案,多指標高通量數字ELISA芯片聚焦微量樣本的多重檢測需求,單個樣本可同時測試2-8個指標,單個芯片支持8樣本并行檢測,實現“片內反應-片內檢測”的一體化設計,有效推動設備小型化。其檢測性能兼具超敏性與極速性,IL-6靈敏度達1pg/ml,檢測范圍1-1000pg/ml,PCT靈敏度10pg/ml,線性范圍覆蓋臨床常見濃度區間。該芯片可替代高敏ELISA、Simoa等技術,在疾病初篩中快速篩選特異性蛋白標記物組合,為**分期判斷、新藥安全性評價提供準確數據。其開放靈活的設計支持2-10個單通道擴展檢測區定制,適配不同檢測場景,尤其適合珍稀樣本的多因子分析,如長期化療患者、嬰幼兒的微量血樣檢測,在保證數據準確性的同時,比較大限度節省樣本與試劑消耗。芯棄疾JX-8B單分子普惠化ELISA檢測產品,微量檢測,使用微量樣本就能測試;什么是數字ELISA快速檢測
芯棄疾芯片可檢測血清中 NfL 等較低豐度神經因子,助力阿爾茨海默癥早期篩查。創新性數字ELISA使用效果
芯棄疾JX-8B數字ELISA高敏檢測產品;具有以下特點:多重、超敏微量、極速靈活、開放;
只有少量分泌蛋白可測量的可能性突顯了蛋白質測量領域面臨的挑戰:醫學上相關的生物標志物可能存在于非常低的豐度中。免疫測定仍然是是蛋白質生物標志物敏感和特異性測量的基礎。然而,傳統的免疫分析技術在檢測不可測量的生物標志物時靈敏度不足,這些生物標志物肯定位于當前可檢測范圍之下。主流的傳統免疫分析方法——包括酶聯免疫吸附試驗(ELISA)、化學發光和電化學發光——的靈敏度下限約為10^-13M(~<0.1pM)。許多降低靈敏度的方法已被描述,包括拉曼增強信號檢測、電感耦合等離子體質譜,但這些方法的數據表明其成功有限。非常規方法如亞飛摩爾級檢測具有明顯的權衡,例如程序較長或無法提供定量答案。
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