盤,請在步驟5之后插入托盤。有關詳細信息,請參閱“抗體恢復”部分。 6.在整個表面上涂適量的一抗吸墨紙架的數量(對于MultiBlot為2.5毫升,對于迷你吸墨紙為5毫升,或10 mL用于Midi印跡)。7.在室溫下孵育10分鐘。解決方案將是吸收到污點固定器中,表面可能會變干。重要提示:請勿在吸塵器清潔后再使用真空吸塵器。孵育10分鐘。8.向下壓框架并施加真空。等待5-8秒,直到框架完全是空的。9.在連續運行真空的情況下,添加30 mL洗滌緩沖液(MultiBlot為15毫升)。重復洗滌步驟3次以上(總共4次洗滌)。當框架完全為空時,將TURN真空關閉。10.在印跡架的表面上涂適量的二抗(對于多印跡,為2.5 mL,5毫升用于迷你印跡,或10毫升用于Midi印跡)。在室溫下孵育10分鐘,然后益啟生物提供專業的細胞計數器。金山區MerckWB實驗加速器Merck儀器
時將毛坯用于堵塞空腔印跡SNAP i.d. @ 2.0迷你吸盤座接受多達7.5倍8.4厘米墨跡SNAP2BHMN0100SNAP i.d.0 2.0 Midi吸筆架接受多達8.5x 13.5厘米的污點。 本用戶指南中使用的符號在本用戶指南和/或產品標簽上使用以下符號,并且用戶應遵守指示要求:象征定義象征定義警告會提醒您采取以下措施可能會造成人身傷害或造成序列號身體上的威脅。批號閱讀文檔制造商目錄號請勿重復使用所需但未提供的材料●真空源:泵或其他均勻的真空源,可提供持續的比較小壓力為410毫巴(12 inHg)和34 L / min。有關泵的目錄號,請參閱《訂購信息》。注意:可以使用我們的WP61系列化學負荷泵,但可能需要更長的處理時間。●一升或更大的帶塞子的保溫瓶(用于廢物收集)。 Mille金山區MerckWB實驗加速器Merck儀器上海益啟生物細胞計數器訂購方便。
白的免疫檢測:SNAP i.d.“ 2.0系統與SNAP 1.d.系統(首先代)與標準免疫檢測一種。 SNAPi.d。 2.0蛋白質檢測b。快照蛋白質檢測。標準系統Midi印跡系統首先代,單孔免疫檢測對照,茴香霉素處理和PDGF處理的3T3小鼠成纖維細胞裂解液(10-0.63 ug)被轉移到Immobilon9-P膜上。印跡被阻止含0.5%的非脂肪干mik(NFDM),并在加筋的鹽水中制備含0. 1%Tweene 20表面活性劑(TBST),并用主要抗B-Tubulin探測(MAB3408)和次級HRP偶聯的山羊螞蟻(AP1 24P)在上述條件。將印跡暴露于X射線膠片一分鐘。圖2. erbB2的免疫檢測:SNAP i.d.9 2.0系統與SNAP i.d.系統(首先代)與標準免疫檢測s。 S
2psi),并需要15秒的時間來灌注電池。加載,然后以27.6kPa(4psi)流動8和6組井停留15秒以捕獲細胞。然后在69kPa處流動6組井韋爾斯1-5(1psi)持續30秒以沖洗裝載通道這些條件可能需要根據您的細胞類型進行優化所需的捕獲密度。6.評估顯微鏡的負載密度。如果負載不足發生了,rcpeat加載協議7.要清理去除未捕獲細胞的腔室,請流過一個或多個入口孔在34.5kPa(5psil的情況下持續5分鐘)的解決方案。在手動模式選項卡上:單擊“運行自定義序列”按鈕或轉到ProtocolEditor輸入所需的參數。有關創建的更多信息壓力[kPa)協議請參閱CellASICONIX2微流體系統程序圖6.1-5井的流速指導。8.進入“細胞培養”或“溶液切換”部分。盤子存放存放在室溫下。不要存放在細胞跨膜電阻儀的直銷公司。
體回收率差。 印跡大會和總議定書 1.用支撐層(藍色邊緣)握住吸墨紙托并弄濕膜層(白色)在潤濕過程中溢出水提供的托盤。不要弄濕支撐層。放置濕的滾動板上的污點固定器。2.如果需要,將印跡預先在甲醇和水中浸濕,然后將其放置在印跡支架中心,蛋白質面朝下。注意:印跡不得超過材料中指定的尺寸必填部分。3.輕輕滾動印跡以去除氣泡,然后稀釋印跡保持并滾動一次。4.打開吸墨紙固定框架,用力將吸墨紙固定在蛋白質面朝上,然后將其放入框架中。一個缺口吸墨架可確保正確放置在框架中。注意:如果只在框架中運行一個MultiBlot,請放置孔空白卡在第二口井中。5.關閉并鎖定框架。加入30 mL封閉溶液(MultiBlot為15毫升)。向下按框架并轉動系統旋鈕施加真空。當框架完全為空時,關閉真空。注意:如果使用抗體回收托Merck樣本制備儀上海授權代理商。虹口區Merck細胞跨膜電阻儀Merck儀器代理商
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A板。在“手動模式”選項卡上(圖7),單擊“運行液體灌注”序列按鈕。或者,在“協議編輯器”選項卡上(圖8)輸入所需的步驟和條件。建議的壓力1-5組井的流動時間為34.5kPa(5psi)和5分鐘,分別。注意:對于傾向于黏附或聚集的細胞,請充分灌注第8組以及第1-5井組將使細胞在細胞中附著于通道的發生率裝貨有關創建協議的更多信息,請參考CelIASICD圖5.CellASICONIX2微流體系統的生產線《ONIX2MicrofluidicSystem用戶指南》。使用空氣壓力實現流量控制,使每一個中的液體都充滿單元加載出色地。板上的多個孔被組合在一起,并通過使用CelASICDONIX2微流體系統的壓力驅動方法通過油路的單個氣動管線每套油井被稱為“油井”。groupA真空管線用于將板密封到萬用板金山區MerckWB實驗加速器Merck儀器