Nature：從血液通過exosomes入手早期確診**。原文標題：Glypican-1identifiescancerexosomesanddetectsearlypancreaticcancer。原文摘要：Exosomes are lipid-bilayer-enclosed extracellular vesicles that contain proteins and nucleic acids. They are secreted by all cells and circulate in the blood. Specific detection and isolation of cancer-cell-derived exosomes in the circulation is currently lacking. Using mass spectrometry analyses, we identify a cell surface proteoglycan, glypican-1 (GPC1), specifically enriched on cancer-cell-derived exosomes. GPC1+ circulating exosomes (crExos) were monitored and isolated using flow cytometry from the serum of patients and mice with cancer. GPC1+ crExos were detected in the serum of patients with pancreatic cancer with absolute specificity and sensitivity, distinguishing healthy subjects and patients with a benign pancreatic disease from patients with early- and late-stage pancreatic cancer. Levels of GPC1+ crExos correlate with tumour burden and the survival of pre- and post-surgical patients. 胸水的外泌體怎么制備？浙江分離外泌體要多少錢

    體液樣本收集外泌體。1、選擇血清還是血漿？推薦大多數研究選擇血漿。血液凝固過程中血小板會產生大量外泌體，含量占血清中外泌體的50%以上，選擇血漿可避免不必要的影響。2、注意抗凝劑的選擇肝素類抗凝劑與PCR假陰性有關，這可能是因為肝素與引物和/或酶有競爭作用。除了***PCR，肝素可以與外泌體結合，阻止細胞攝取外泌體。因此需要記錄肝素類藥物治療的患者的血液樣本。EDTA和雙嘧達莫（CTAD），CTAD可以阻止血小板的***并***其釋放外泌體。EDTA可能會干擾PCR反應（盡管其程度小于肝素），但是還是優于其他選擇。此外，有研究表明鈣螯合劑可在體外促進外泌體與血小板的結合從而降低經EDTA、或檸檬酸鹽處理后的血液樣本中外泌體的表觀數量。使用肝素時這種影響就不會發生，因此建議在測量外泌體的精確數量時選用肝素。但是也有研究表明肝素可以導致體外條件下外泌體的減少。總之，目前尚需要更多的研究論證抗凝劑是否及如何對外泌體的釋放，作用和下游反應產生特異性影響。 天津鑒定外泌體多少錢外泌體數據庫有哪些？

⊙外泌體發揮功能并一定需要受體細胞攝入外泌體：外泌體的膜蛋白有可能與細胞膜蛋白作用，***細胞內通路

⊙外泌體的角色之一：細胞-細胞通訊，比如抗原遞呈

⊙外泌體的角色之二：垃圾箱，外排多余或者無功能的細胞成分

為什么要研究外泌體？：

⊙揭示疾病發病機制：從微環境角度揭示細胞之間通訊促進疾病發生的原因。

⊙尋找疾病診斷和預后的分子標志物

⊙外泌體作為藥物載體，實現靶向給藥

外泌體的分離和鑒定方法：

⊙外泌體的分離：差速離心、密度梯度離心、體積排阻色譜法、過濾法、聚合物沉淀法、免疫分離、隔離篩選法

⊙外泌體分離后需要進行粒徑分析：如NanoSight NS300

⊙外泌體檢測的marker：常用的有TSG101、CD9、CD63、CD81、ALIX、HSP70

industryTemplate血漿樣品外泌體怎么制備？

    眾所周知，成熟的miRNA可以與裝配蛋白（assemblyproteins）相互作用，形成一個復合物，稱miRISC。miRISC的主要成分包括miRNA、可被miRNA***的mRNA、GW182和AGO2。人類AGO2蛋白，主要結合miRNA5’末端的U或A堿基，能介導mRNA和miRNA結合，介導后續的翻譯***或mRNA分子降解。**近研究發現AGO2蛋白和外泌體miRNA分揀機制之間有一種可能的聯系。對外泌體蛋白進行分析時，用質譜MS或WBD都有發現AGO2蛋白的存在。Guduric-Fuchsetal.發現敲除了AGO2基因后，會減少那些偏好于進入外泌體的miRNA的類型或豐度，如HEK293T細胞系來源的外泌體中的miR-451,miR-150和miR-142-3p。還有些證據也支持miRISC和外泌體miRNA分揀之間的聯系。首先，miRISC的主要成分被發現與MVB（多囊泡小體）有相同定位；其次，阻礙MVB被溶酶體降解會導致miRISC的過度累積，而阻斷MVB形成會導致miRISC的丟失；再次，細胞***時出現的miRNA***靶序列水平的變化可能引起外泌體miRNA的分揀。總之，某些miRNA中的特異序列可能指導它們整合入外泌體，而有些酶或其他蛋白質可能也能控制外泌體miRNA的分揀--以一種不依賴于miRNA序列的形式。 做外泌體就找云生物！四川測序外泌體多少錢

云生物抽提的外泌體可進行粒徑檢測。浙江分離外泌體要多少錢

轉移的**細胞為適應新環境，沉默了自己的基因，促進**轉移灶形成，而沉默基因的正是外泌體中的microRNA。文章概要為：“Microenvironment-induced PTEN loss by exosomal microRNA primes brain metastasis outgrowth”，由外泌體分泌的microRNA引起微環境介導的PTEN丟失，為腦轉移生長做了準備。這篇是2015.10.19發表在Nature 上的文章，文章主要講的是，腦環境依賴的PTEN可回復性表達，受腦內的星形膠質細胞分泌的外泌體中的microRNA調控。浙江分離外泌體要多少錢