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GSDME全長蛋白在切割前是沒有活性的，N端和C端結構域之間的分子內相互作用調控自抑制。caspase-3可以將全長GSDME，剪切成有活性的N端（包含1-270a段的GSDME-N）和C端（GSDME-C）。如果需檢測到N端或者C端的GSDME片段，細胞通常需要誘導處理。在檢測GSDME全長時需注意，其表達水平因樣品類型（組織和細胞）而異，可能在部分組織和細胞株系表達，其表達水平也存在差異，因此需要對樣品處理和WB實驗進行一些優化。建議設置陽性和陰性對照。并且組織樣本成分更復雜，在WB實驗時可能出現多條條帶現象。成都瑞普信專業第三方檢測公司WB,QPCR,ELISA。

磷酸化蛋白的WB第三方檢測在實操過程中有哪些注意事項？“研究完某一蛋白的磷酸化情況后比較好也要研究一下該蛋白總的表達量 ”。這有兩種方法，一是：相同的 sample 在不同的 well 中上樣兩次，可在相同的gel上，也可在不同的gel。其一壓磷酸化蛋白，另一壓該蛋白總的表達量（包括磷酸化和未磷酸化的該蛋白），甚至還可跑另一個 gel ，壓內標。但是本人不建議如此做，因為這樣比較時誤差還是較大的。因此，比較公認的，本人也建議如此的方法，即：將原先結合上的磷酸化抗體及二抗用 strip solution 洗去。成都瑞普信生物技術有限公司專業第三方檢測QPCR。西藏生物試劑第三方檢測中心

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第三方檢測細胞實驗，Westernblot實驗，WB代測，QPCR代測，購買原代細胞，細胞株，找成都瑞普信。Westernblot實驗常見問題合集：3.條帶拖尾。原因：樣品有未溶顆粒；分離膠濃度偏大；解決方法：充分溶解，加樣前離心；換小濃度分離膠。4.條帶扭曲，如微笑帶。原因：膠未配好（凝膠未能完全聚合，膠中有顆粒或氣泡，凝膠未冷卻好，）；電壓過高；解決方法：正確添加質量合格且未過期的AP及TEMED；過濾配膠的試劑保證配膠過程中膠內無氣泡；凝膠冷卻好后再上樣；降低電壓。基礎實驗靠譜第三方檢測公司，第三方WB實驗、QPCR實驗、ELISA試劑盒檢測服務，就找瑞普信。病理包埋第三方檢測機構

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