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重慶IHC第三方檢測方法

來源: 發布時間:2022-08-24

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“做miRNA下調,QPCR檢測miRNA,表達水平無變化”如何解決呢?反義核酸是在轉錄后水平發揮功能,要阻斷miRNA的產生,理想情況是在生成成熟的miRNA之前阻斷。此要求目前唯有CRISPR / Cas9能實現,Cas9通過在pre-miRNA序列中引入突變,從而破壞miRNA表達,是miRNA基因功能缺失研究的一種新方法。福建肖老師運用Cas9技術,針對miR-21基因設計sgRNA ,通過慢病毒遞送細胞,并在RNA水平檢測到mir-21的下調表達,從而研究出miR-21耗竭對CNE2鼻咽(NPC)細胞生物學特性及其潛在機制的影響。使用Cas9敲除miR-21之后,功能上也呈現出陽性,此外,溫醫大醫院的張老師使用Cas9敲除mir-545,研究了人環狀RNA PRKCI(circPRKCI)通過抑制miR-545顯示致性,促進人類神經膠質瘤細胞的病理進展3。所以,CRISPR / Cas9對于miRNA的KO是有效的、被認可的、且以QPCR檢測表達量完全沒有問題。

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