qPCR第三方檢測方法的分析驗證有哪些內(nèi)容?效率不僅是 PCR 效率,還包含反轉(zhuǎn)錄(Reverse transcription,RT)的效率。RT 效率是指 RNA 合成 cDNA 的效率,如果 1,000 個 RNA 分子變成 1,000 個 cDNA 分子,效率就是 100% ,實際上很多 RT 酶的效率對于不同濃度的 RNA 樣本存在差異,這樣 cDNA 擴增后的結(jié)果并不能真實反映樣品中 RNA 的水平。PCR 效率是指 DNA 在擴增的每個循環(huán)中復(fù)制的效率,每個循環(huán)增加 2 倍,其效率就是 100% ,這也和所選試劑、引物、模板質(zhì)量密切相關(guān)。梯度稀釋實驗得到的標準曲線可直觀地顯示各濃度理論值和測得的 Cq 值的相關(guān)性,其中 R2 值表示各個數(shù)據(jù)點是否正好落在標準曲線上,當 R2 < 0.98 時,表明數(shù)據(jù)偏差較大。成都瑞普信生物技術(shù)有限公司第三方檢測WB實驗。四川masson染色第三方檢測機構(gòu)
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