分裝:配制好的培養(yǎng)基根據(jù)不同的用途分裝在三角瓶、試管等容器中,分裝試管,如果試管量很大,可用自動分液器。如果試管量少,可用漏斗分裝。分裝量不超過容器容積的三分之二。三角瓶以不超過容積的二分之一為宜;瓊脂斜面以不超過試管長度的五分之一為宜,滅菌后,擺成的斜面為培養(yǎng)基的三分之一、底層為三分之二的量為宜;半固體瓊脂分裝量為試管長度的的三分之一;用來接種或保菌的高層瓊脂,分裝量為試管長度的四分之一或三分之一,用來接種厭氧菌的要達到三分之二;瓊脂平板,內(nèi)徑90mm的以13ml~15ml為宜,內(nèi)徑70mm的平板為8ml~10ml,制成的瓊脂平板。加熱板溫度不穩(wěn)應校準溫控器或更換傳感器。陜西培養(yǎng)基制備器售后
培養(yǎng)基的實驗室制備:①概述:培養(yǎng)基和試劑的滅菌通常采用濕熱滅菌或過濾滅菌。有些培養(yǎng)基無需高壓滅菌,可煮滅菌。如,含亮綠的腸道菌培養(yǎng)基對光和熱特別敏感,應在煮沸后快速冷卻,避光保存。同樣,一些試劑則不需要滅菌,直接使用(參見相關(guān)標準或生產(chǎn)廠商的使用說明)。②濕熱滅菌;p濕熱滅菌在高壓鍋或培養(yǎng)基制備器中進行。高壓霉菌一般采用121℃±3℃霉菌15min。如果培養(yǎng)基的體積超過1000mL,要對滅菌條件進行適當?shù)恼{(diào)整。所有操作均要按照標準和使用說明的規(guī)定進行。注:大容量培養(yǎng)基(>1000mL)滅菌時可能會造成過度加熱。加熱后應采取適當?shù)姆绞嚼鋮s,防止沸溢。這對大容量培養(yǎng)基和敏感性培養(yǎng)基(如含亮綠的培養(yǎng)基)是非常重要的。進口培養(yǎng)基制備器廠家培養(yǎng)基制備器勿將血清置于37℃太久。若在37℃放置太久,血清會變得混濁!
配制培養(yǎng)基的原則:調(diào)節(jié)氧化還原電位(Eh)各種微生物對培養(yǎng)基的Eh要求不同。適宜好氧微生物生長的Eh值一般為+0.3~+0.4V,厭氧微生物只能在+0.1V以下生長,因此,培養(yǎng)好氧微生物必須保證氧的供應,可在培養(yǎng)基中加入氧化劑提高Eh值。調(diào)節(jié)滲透壓多數(shù)微生物能耐受較大范圍滲透壓的變化。培養(yǎng)基中營養(yǎng)物質(zhì)的濃度過大,會使?jié)B透壓過高,使細胞發(fā)生質(zhì)壁分離而抑制微生物生長。低滲溶液則使細胞吸水膨脹易破裂,因此,配制培養(yǎng)基時要掌握營養(yǎng)物質(zhì)的濃度。常在培養(yǎng)基中加人適量的Nacl以提高滲透壓。原料來源的選擇力求節(jié)約:配制培養(yǎng)基還應遵循力求節(jié)約的原則,盡量選用價格便宜、來源方便的原料。特別是在工業(yè)發(fā)酵中,培養(yǎng)基用量大,更應注意利用低成本的原料,降低產(chǎn)品成本。
培養(yǎng)基的物理滅菌方法:(一)加熱滅菌法:加熱可破壞微生物中酶、蛋白質(zhì)和核酸,導致微生物死亡。加熱滅菌又分干熱滅菌法和濕熱滅菌法。在同一溫度下,濕熱滅菌的效果比干熱滅菌好。主要是因濕熱滅菌時,有水分存在,蛋白質(zhì)容易變性。水分又易使微生物膜壁潤濕,濕熱的穿透力比干熱大。常用的有火焰滅菌法與干熱空氣滅菌法兩種。(二)紫外線滅菌法:是指用紫外線照射殺滅微生物的方法。一般用于滅菌的紫外線波長是200~300nm,滅菌力較強的波長是253.7nm。紫外線作用于核酸蛋白促使其變性,同時空氣受紫外線照射后產(chǎn)生微量臭氧,從而起共同殺菌作用。紫外線進行直線傳播,可被不同的表面反射,穿透力微弱,但較易穿透清潔空氣及純凈的水。滅菌失效需驗證溫度均勻性和保持時間。
Systec培養(yǎng)基準備器的滅菌:Systec培養(yǎng)基準備器能夠保證快速溫和的制備標準和高敏感性培養(yǎng)基。的加熱冷卻系統(tǒng)加上均勻的攪拌,大程度上減低了對培養(yǎng)基的熱應力,保證了培養(yǎng)基的營養(yǎng)性。Systec培養(yǎng)基準備器的操作高度安全:滅菌開始前,會有一個程序自動檢查整個系統(tǒng)的氣密性,例如:鍋蓋的密封圈是否完好,這能夠避免培養(yǎng)基在滅菌過程中突然漏氣引起卸壓,此外,Systec培養(yǎng)基準備器有4個溫度/壓力檢測器,保證用戶及工作環(huán)境的高度安全。鍋蓋上裝有的過壓安全保護裝置,在電子檢測系統(tǒng)失效時,自動卸壓以保障安全。**兼容外接冷卻**:如支持冷水浴槽或快速轉(zhuǎn)移至冷卻模塊。重慶不銹鋼內(nèi)桶培養(yǎng)基制備器
培養(yǎng)基制備器必須附有該批培養(yǎng)基制備記錄副頁或明顯標簽!陜西培養(yǎng)基制備器售后
制備培養(yǎng)基的操作要點:用過的玻璃器皿:凡確無病原菌或未被帶菌物污染的器皿,使用后可隨時沖洗,吸取過化學試劑的吸管,可先浸泡于清水中,待到一定數(shù)量后再集中進行清洗。有可能被病原菌污染的器皿,必須經(jīng)過適當消毒后,將污垢除去,用皂液洗刷,再用流水沖洗干凈。若用皂液未能洗凈的器皿,可用洗液浸泡適當時間后再用清水洗凈。洗液的主要成份是重鉻酸鉀和濃流酸,其作用是將有機物氧化成可溶性物質(zhì),以便沖洗。洗液有很強的腐蝕作用,使用時應特別小心,避免濺到衣服、身體和其他物品上。陜西培養(yǎng)基制備器售后