培養基制備器:培養基的種類繁多,但制備的方法大同小異,一般可分為6個步驟:用水、稱量、溶解復水、滅菌、pH測定、保存。1、必須選用專門純凈水或者經消毒過后的無菌水。2、培養基進行復水的容器不得用銅鍋或鐵鍋,放置離子混入培養基中,影響微生物的生長。3、容器的體積須大于復水后培養基總體積的2倍,預防出現溢出情況。4、在對培養基進行加熱時,若培養基內含有瓊脂粉成分,則需要將其充分浸泡一段時間。加熱的過程中不斷進行攪拌防止出現培養基結底炭化從而造成成分損害。部分培養基則需要使用沸水進行加熱,預防發生局部燒焦及沸騰溢出。5、瓊脂類培養基進行再融化時應使用沸水浴或流動蒸汽進行加熱,較多只能加熱兩次,第二次再融化后仍未用完的培養基應棄去。6、而當對培養基實施滅菌時,需嚴格按照說明規范操作。但是也不能盲目按照說明的時間進行,需結合實際情況,合理調節滅菌時間,防止出現培養基滅菌過度而造成的成分變性。冷卻過程中需確保密閉性(如帶無菌過濾膜的通風口),避免污染。中國澳門自動攪拌培養基制備器
平板的制備和儲存:傾注融化的培養基到平皿中,使之在平皿中形成厚度至少為3mm(直徑90mm的平皿,通常要加入18mL?20mL瓊脂培養基)。將平皿蓋好皿蓋后放到水平平面使瓊脂冷卻凝固。如果平板需儲存,或者培養時間超過48h或培養溫度高于40℃,則需要傾注更多的培養基。凝固后的培養基應立即使用或存放于暗處和(或)5±3℃冰箱的密封袋中,以防止培養基成分的改變。在平板底部或側邊做好標記,標記的內容包括名稱、制備日期和(或)有效期。也可使用適宜的培養基編碼系統進行標記。將倒好的平板放在密封的袋子中冷藏保存可延長儲存期限。為了避免冷凝水的產生,平板應冷卻后再裝入袋中。儲存前不要對培養基表面進行干燥處理。對于采用表面接種形式培養的固體培養基,應先對瓊脂表面進行干燥:揭開平皿蓋,將平板倒扣于烘箱或培養箱中(溫度設為25~50℃);或放在有對流的無菌凈化臺中,直到培養基表面的水滴消失為止。注意不要過度干燥。商品化的平板瓊脂培養基應按照廠商提供的說明使用。湖北培養基制備器全自動滅菌程序可快速完成高溫高壓滅菌流程。
培養基的制備:正確制備培養基時微生物檢驗的較基礎步驟之一。使用脫水培養基和其他成分,尤其是含有有毒物質(如膽鹽或其他選擇劑)的成分時,應遵守良好實驗室規范和生產廠商提供的使用說明。培養基的不正確制備會導致培養基出現質量問題。使用商品化脫水合成培養基制備培養基時,應嚴格按照廠商提供的使用說明配置。記錄所有相關數據,如質量/體積、pH、制備日期、滅菌條件和制備人員等。使用各別成分制備培養基時,應按照配方準確配制,記錄所有細節信息,如;培養基名稱和類型及試劑級別、每個成分物質含量、制造商、批號、pH、培養基體積(分裝體積)、無菌措施(包括實施的方式、溫度及時間)、配置日期、人員等,以便潮源。
在制備培養基時,通常要考慮以下因素:(1)pH值多數細胞系在pH=7.4下生長得很好。盡管各細胞株之間細胞生長*pH值變化很小,但一些正常的成纖維細胞系以pH=7.4~7.7,轉化細胞以pH=7.0~7.4更合適。據報道,上皮細胞以pH=5.5合適。為確定*佳pH值,做一個簡單的生長實驗或特殊功能分析酚紅常用作指示劑,pH=7.4呈紅色,pH=7.0變橙色,pH=6.5變黃色,而pH=7.6呈紅色中略帶藍色,pH=7.8呈紫色。由于對顏色的觀察有很大的主觀性,因而必須用無菌平衡鹽溶液和同樣濃度的酚紅配一套標準樣,放在與制備培養基相同的瓶子中。(2)緩沖能力碳算鹽緩沖系統由于毒性小、成本低、對培養物有營養作用,因此比其他緩沖系統用得多。在pH值條件下的緩沖能力差。(3)滲透壓多數培養細胞對滲透壓有很寬的耐受范圍,一般常用冰點降低或蒸汽壓升高測定。如果自己配培養基,可通過測定滲透壓防止稱量和稀釋等造成的誤差??焖倮鋮s減少培養基暴露于環境的時間,避免空氣中微生物污染。
制備培養基有什么要求:1、培養基需保持澄清,便于觀察細菌的生長情況,培養基加熱煮沸后,可用脫脂棉花或絨布過濾,以除去沉淀物,必要時可用雞蛋白澄清處理,所用瓊脂條要預先洗凈晾干后使用,避免因瓊脂含雜質而影響透明度。2、盛裝培養基不宜用鐵、銅等容器,使用洗凈的中性硬質玻璃容器為好。3、培養基的滅菌既要達到完全滅菌目的,又要注意不因加熱而降低其營養價值,121℃15min即可,如為含有不耐高熱物質的培養基如糖類、血清、明膠等,則應采用低溫滅菌或間歇法滅菌,一些不能加熱的試劑如亞碲酸鉀、卵黃、TTC、克菌素等,待基礎瓊脂高壓滅菌后涼至50℃左右再加入。頻繁報錯建議導出日志進行專業診斷。新疆瓊脂培養基 培養基制備器
不銹鋼材質罐體耐腐蝕,延長設備使用壽命。 適用于臨床診斷試劑培養基的標準化批量生產。中國澳門自動攪拌培養基制備器
過濾:配成的培養基,若無特殊要求,可省略此步。若有沉淀或渾濁,需要澄清的,液體培養基可用濾紙過濾。而固體培養基可用中間夾一薄層脫脂棉的雙層紗布過濾。如果過濾法還不能達到澄清的要求,則可用蛋清澄清法,即培養基加熱冷卻到50℃~60℃,裝入三角瓶內(不超過容量的二分之一),按1000ml加入1個~2個雞蛋的蛋清,用力搖晃3min~5min,高壓蒸汽滅菌121℃、20min,取出趁熱過濾即可。擺斜面:裝在試管中的瓊脂培養基,在滅菌完成后,趁熱立即擺放在木棒(或玻璃棒)上,并完成適時地斜度,冷卻后,瓊脂凝固即成斜面。斜面長度不要超過試管的二分之一。中國澳門自動攪拌培養基制備器