實驗室在制作培養(yǎng)基時候的經(jīng)驗總結:1、培養(yǎng)基pH值的調正:pH因培養(yǎng)基在加熱消毒過程中、pH會有所變化,培養(yǎng)基各成分完全溶解后,應進行pH的初步調正。例如,牛肉浸液約可降低pH0.2,而腸浸液pH卻會有明顯的升高。因此,對這個步驟,操作者應隨時注意探索經(jīng)驗、以期能掌握培養(yǎng)基的較終pH,保證培養(yǎng)基的質量。pH調整后,還應將培養(yǎng)基煮沸數(shù)分鐘,以利培養(yǎng)基沉淀物的析出。2、培養(yǎng)基過濾澄清:液體培養(yǎng)基必須澄清,瓊脂培養(yǎng)基也應透明無明顯沉淀,因此,須要采用過濾或其它澄清方法以達到此項要求。一般液體培養(yǎng)基可用濾紙過濾法,濾紙應折疊成折扇或漏斗形,以避免因液壓不均勻而引起濾紙破裂。通過國際安全認證,滿足生物安全實驗室等級要求。江西不銹鋼內桶培養(yǎng)基制備器
全自動培養(yǎng)基制備器十分靈活——隨時可以讓你快速的滅菌制備高質量的培養(yǎng)基。這可以好大限度的減少用于儲藏成品培養(yǎng)皿的空間,消除對培養(yǎng)皿儲存的管理,保證高質量的培養(yǎng)基均一性。它能夠迅速而溫和的滅菌培養(yǎng)基并精確監(jiān)控和控制滅菌過程中的時間、溫度、壓力等參數(shù),從而保證其所有滅菌的產(chǎn)品都擁有同樣的,其直觀的圖形界面及可編程功能能使每個人都能方便的操作這臺儀器。培養(yǎng)基制備程序:Sampleprep可以快速的準備好滅菌,放入滅菌鍋,“水套系統(tǒng)”里加入夾層水(滅菌鍋與滅菌鍋腔體之間的夾套水用于有效的熱傳導),加入培養(yǎng)基原料,準備啟動滅菌程序。培養(yǎng)基可以直接在Sampleprep內懸浮溶解。強力磁力攪拌確保培養(yǎng)基在內腔里混合的均勻性,并防止凝結。培養(yǎng)基可以在滅菌前用WATERBATH(水浴)模式預先溶解。同時,直觀的圖形化界面使沒有經(jīng)過專門培訓的人員也能方便的操作。用戶可以自定義設置多達50個滅菌程序,比如滅菌溫度、時間、分裝溫度等。它們可以被儲存起來并隨時調用。寧夏觸摸屏培養(yǎng)基制備器快速滅菌程序可在30分鐘內完成標準培養(yǎng)基處理。 支持固體、液體及半固體培養(yǎng)基的一體化制備。
MS培養(yǎng)基的特點:MS培養(yǎng)基普遍被使用,它的無機鹽濃度較高,十分有利于組織生長所需的礦質營養(yǎng)和加速愈傷組織的生長。因為配方中的離子濃度高,在配制、貯存、消毒等過程中,即使有些成分略有出入,也不會對離子間的平衡造成比較大的影響。MS固體培養(yǎng)基可以用來對愈傷組織可以進行誘導,或者用來培養(yǎng)胚、莖段、莖尖及花藥。在進行細胞懸浮培養(yǎng)時,它的液體培養(yǎng)基能夠得到非常明顯的效果。在這種培養(yǎng)基中,有比較適當比例和數(shù)量的無機養(yǎng)分,能夠滿足植物細胞在營養(yǎng)上和生理上的需要。所以,通常情形下,氨基酸、酪蛋白水解物、酵母提取物及椰子汁等有機附加成分不需要再被添加。MS培養(yǎng)基中的硝酸鹽、鉀和銨的含量相比于其它培養(yǎng)基的基本成分要更加的高,這亦是其的明顯特征。
高效而強大的加熱和制冷系統(tǒng):功能強大的加熱器,能夠迅速加熱;快速制冷是通過循環(huán)水和壓力(加入內部的軟化水產(chǎn)生的)所進行的。利用與外部水連接的盤狀熱交換器,能夠使內部迅速冷卻,整個過程包括:加熱、滅菌和冷卻(至50°C),依據(jù)容器的大小、培養(yǎng)基的數(shù)量和冷卻水的溫度,只需60-120分鐘即可完成。負載的壓力,有效地避免了培養(yǎng)基過溫失效和培養(yǎng)基中氣泡的產(chǎn)生。空氣壓縮機是內置的。全自動控制程序,確保內部溫度均一,從而保證了配制和滅菌的培養(yǎng)基具有更高的質量,整個過程,在一個設定溫度內,從z初的加熱到混合和滅菌,z后到冷卻,都是微處理器控制的,而且滅菌之后保持的溫度是可以預設的。殺菌劑裝入口寬大,并附有保險鎖。殺菌劑可從此口加入,也可用注射器從硅酮膜注入。培養(yǎng)基制備器使用注射器將添加劑加入,確保了添加劑的無菌添加!
濕熱滅菌:濕熱滅菌在高壓鍋或培養(yǎng)基制備器中進行,高壓滅菌一般采用121℃±3℃滅菌15min,具體培養(yǎng)基按食品微生物學檢驗標準中的規(guī)定進行滅菌。培養(yǎng)基體積不應超過1000mL,否則滅菌時可能會造成過度加熱。所有的操作應按照標準或使用說明的規(guī)定進行。滅菌效果的控制是關鍵問題。加熱后采用適當?shù)姆绞嚼鋮s,以防加熱過度。這對于大容量和敏感培養(yǎng)基十分重要,例如含有煌綠的培養(yǎng)基。過濾除菌:過濾除菌可在真空或加壓的條件下進行。使用孔徑為0.2μm的無菌設備和濾膜。消毒過濾設備的各個部分或使用預先消毒的設備。一些濾膜上附著有蛋白質或其他物質(如物品),為了達到有效過濾,應事先將濾膜用無菌水潤濕。滅菌失效需驗證溫度均勻性和保持時間。寧夏培養(yǎng)基滅菌 培養(yǎng)基制備器
快速升溫至目標溫度(如121°C)可確保徹底殺滅微生物(包括耐熱芽孢),避免因升溫慢導致滅菌不徹底。江西不銹鋼內桶培養(yǎng)基制備器
培養(yǎng)基的配制:1、配料:在容器中加入少量水,按照配方稱取各種藥品,加足所需水量(一藥一勺,取藥后立即蓋上瓶蓋)。2、溶解:淀粉溶解:少量冷水調成糊狀,加熱溶解,特別是加有瓊脂的培養(yǎng)基,一定要煮沸,瓊脂的熔解溫度95-97℃,且需要邊加熱邊攪拌以防止燒焦。3、調PH:用1N的鹽酸或1N的NaOH把培養(yǎng)基調節(jié)到所要求的值。4、過濾:濾紙或棉花進行過濾。5、分裝:一般培養(yǎng)基放在三角瓶或試管中滅菌使用。(1)三角瓶:若作靜置培養(yǎng),則100ml培養(yǎng)基/250ml的三角瓶,較多不能超過150ml培養(yǎng)基/250ml的三角瓶,否則滅菌時培養(yǎng)基沸騰容易污染棉塞,造成染菌;若作搖瓶培養(yǎng),則15-20ml培養(yǎng)基/250ml的三角瓶,保證通氣良好。(2)試管分裝:液體培養(yǎng)基一般裝4-5ml,約試管的1/4高度。固體斜面培養(yǎng)基一般裝3-4ml,約試管的1/5高度。6、包扎:分裝好后,塞上棉塞,在用牛皮紙將棉塞包裹好,防止滅菌時水份進入把棉塞弄濕。7、滅菌:按配方上要求的溫度、壓力進行高壓蒸汽滅菌。如果滅菌的溫度太高,營養(yǎng)成分會被破壞,培養(yǎng)基中的糖、氨基酸會使培養(yǎng)基的顏色變深。江西不銹鋼內桶培養(yǎng)基制備器