固體斜面培養(yǎng)基配制:培養(yǎng)基各成份的混合和溶化:培養(yǎng)基所用化學藥品均應是化學純的。使用的蒸煮鍋不得為銅鍋或鐵鍋,以防有微量銅或鐵混入培養(yǎng)基中,使細菌不易生長。較好使用不銹鋼萵加熱溶化,可放入大燒杯或大燒瓶中置高壓蒸汽滅菌器或流動蒸汽消毒器中蒸煮溶化。在鍋中溶化時、可先用溫水加熱并隨時擾動、以防焦化、如發(fā)現有焦化現象、該培養(yǎng)基即不能使用,應重新制備。待大部分固體成分溶化后,再用較小火力使所有成分完全溶化,迄至煮沸。如為瓊脂溶化,用另一部分水溶化其它成分,然后將兩溶液充分混合。在加熱溶化過程中,因蒸發(fā)而丟失的水分,較后必須加以補足。培養(yǎng)基pH的初步調正:因培養(yǎng)基在加熱消毒過程中、pH會有所變化,培養(yǎng)基各成分完全溶解后,應進行PH的初步調正。觸控界面簡化操作步驟,減少人工干預誤差風險。上海進口培養(yǎng)基制備器
溶化:培養(yǎng)基放入燒杯或瓷缸中,慢慢加入少量所需水,邊加入邊用玻璃棒攪拌。如果培養(yǎng)基中不含有瓊脂,培養(yǎng)基不需要加熱;如果含有瓊脂,則需要用本生燈或電磁爐加熱煮沸,完全溶解后,再補齊所需水,并攪拌均勻。如果配置的培養(yǎng)基量很大,可用不銹鋼鍋加熱溶化,可先用溫水加熱并隨時攪動,防止焦化,如有焦化現象,配制的培養(yǎng)基就不能使用,要重新配制。配制培養(yǎng)基時不可用銅或鐵的容器溶化,因銅或鐵制容器可能會使培養(yǎng)基中的銅和鐵的含量超標,影響實驗(培養(yǎng)基中銅含量大于0.3mg/L,細菌不宜生長,鐵含量超過0.14mg/L,妨礙細菌產有害)。對容易發(fā)生反應,產生沉淀的藥品,要分開溶解,較后加入培養(yǎng)基,如磷酸二氫鉀和硫酸鎂。上海進口培養(yǎng)基制備器自動排汽功能減少氣泡生成,提升培養(yǎng)基均質度。
培養(yǎng)基的過濾澄清:液體培養(yǎng)基必須較全澄清,瓊脂培養(yǎng)基也應透明無明顯沉淀,因此,須要采用過濾或其它澄清方法以達到此項要求。一般液體培養(yǎng)基可用濾紙過濾法,濾紙應拆疊成折扇成漏斗形,以避免因液壓不均勻而引起濾紙破裂。瓊脂培養(yǎng)基可用清潔的白色薄絨布趁熱過濾。亦可用中間夾有薄層吸水棉的雙層紗布過濾。新制肉、肝、血和土豆等浸液時、則須先用絨布將碎渣濾去,再用濾紙反復過濾。如過濾法不能達到澄清要求、則須用蛋清澄清法。即將冷卻至55-60℃的培養(yǎng)基放入大的三角燒瓶內,裝入量不得超過燒瓶容量的1/2,每1000ml培養(yǎng)基加入1-2個雞蛋的蛋白.強力振搖3-5分鐘,置高壓蒸汽滅菌器中、121℃加熱20分鐘、取出趁熱以絨布過濾即可。
培養(yǎng)基的實驗室制備:正確制備培養(yǎng)基時微生物檢驗的較基礎步驟之一。使用脫水培養(yǎng)基和其他成分,尤其是含有有毒物質(如膽鹽或其他選擇劑)的成分時,應遵守良好實驗室規(guī)范和生產廠商提供的使用說明。培養(yǎng)基的不正確制備會導致培養(yǎng)基出現質量問題。使用商品化脫水合成培養(yǎng)基制備培養(yǎng)基時,應嚴格按照廠商提供的使用說明配置。記錄所有相關數據,如質量/體積、pH、制備日期、滅菌條件和制備人員等。使用各別成分制備培養(yǎng)基時,應按照配方準確配制,記錄所有細節(jié)信息,如;培養(yǎng)基名稱和類型及試劑級別、每個成分物質含量、制造商、批號、pH、培養(yǎng)基體積(分裝體積)、無菌措施(包括實施的方式、溫度及時間)、配置日期、人員等,以便潮源。培養(yǎng)基制備器鋁制表面光滑平坦;易于清潔,無孔隙和裂縫,以防培養(yǎng)基流進去!
孢子培養(yǎng)基:孢子培養(yǎng)基是供菌種繁殖孢子的一種常用固體培養(yǎng)基,對這種培養(yǎng)基的要求是能使菌體迅速生長,產生較多較好的孢子,并要求這種培養(yǎng)基不易引起菌種發(fā)生變異。所以對孢子培養(yǎng)基的基本配制要求是:靠前,營養(yǎng)不要太豐富(特別是有機氮源),否則不易產孢子。如灰色鏈霉在葡萄糖-硝酸鹽-其它鹽類的培養(yǎng)基上都能很好地生長和產孢子,但若加入0.5%酵母膏或酪蛋白后,就只長菌絲而不長孢子。第二,所用無機鹽的濃度要適量,不然也會影響孢子量和孢子顏色。第三,要注意孢子培養(yǎng)基的pH和濕度。生產上常用的孢子培養(yǎng)基有:麩皮培養(yǎng)基、小米培養(yǎng)基、大米培養(yǎng)基、玉米碎屑培養(yǎng)基和用葡萄糖、蛋白胨、牛肉膏和食鹽等配制成的瓊脂斜面培養(yǎng)基。大米和小米常用作霉菌孢子培養(yǎng)基,因為它們含氮量少,疏松、表面積大,所以是較好孢子培養(yǎng)基。大米培養(yǎng)基的水分需控制在21%-50%,而曲房空氣濕度需控制在90%-靠前。培養(yǎng)基制備器必須附有該批培養(yǎng)基制備記錄副頁或明顯標簽!湖北培養(yǎng)基消毒 培養(yǎng)基制備器
Systec培養(yǎng)基制備器采用模塊化設計,適配多種培養(yǎng)基類型需求。上海進口培養(yǎng)基制備器
培養(yǎng)基的配制:1、配料:在容器中加入少量水,按照配方稱取各種藥品,加足所需水量(一藥一勺,取藥后立即蓋上瓶蓋)。2、溶解:淀粉溶解:少量冷水調成糊狀,加熱溶解,特別是加有瓊脂的培養(yǎng)基,一定要煮沸,瓊脂的熔解溫度95-97℃,且需要邊加熱邊攪拌以防止燒焦。3、調PH:用1N的鹽酸或1N的NaOH把培養(yǎng)基調節(jié)到所要求的值。4、過濾:濾紙或棉花進行過濾。5、分裝:一般培養(yǎng)基放在三角瓶或試管中滅菌使用。(1)三角瓶:若作靜置培養(yǎng),則100ml培養(yǎng)基/250ml的三角瓶,較多不能超過150ml培養(yǎng)基/250ml的三角瓶,否則滅菌時培養(yǎng)基沸騰容易污染棉塞,造成染菌;若作搖瓶培養(yǎng),則15-20ml培養(yǎng)基/250ml的三角瓶,保證通氣良好。(2)試管分裝:液體培養(yǎng)基一般裝4-5ml,約試管的1/4高度。固體斜面培養(yǎng)基一般裝3-4ml,約試管的1/5高度。6、包扎:分裝好后,塞上棉塞,在用牛皮紙將棉塞包裹好,防止滅菌時水份進入把棉塞弄濕。7、滅菌:按配方上要求的溫度、壓力進行高壓蒸汽滅菌。如果滅菌的溫度太高,營養(yǎng)成分會被破壞,培養(yǎng)基中的糖、氨基酸會使培養(yǎng)基的顏色變深。上海進口培養(yǎng)基制備器