而在指數增長期，由于底物充足，聚合酶活性高，反應產物以指數形式積累，且與初始模板量存在定量關系，因此，在該時期對模板起始量進行定量分析準確且重復性比較好。Ct值，是在指數增長期內，熒光信號到達熒光檢測閾值時所經歷的循環數，其中C循環(Cycle)，t閾值（threshold)。每條擴增曲線的Ct值都與初始模板量的對數存在線性關系，初始模板的拷貝數濃度越高，對應的Ct值越小;反之則越大。因此，先根據已知拷貝數濃度標準品的擴增曲線擬合出標準曲線方程，再將樣本擴增曲線的Ct值代入標準曲線方程中，便可計算未知樣本初始模板的拷貝數濃度，從而實現定量分析。q225 加樣孔板側壁和金屬熱塊能夠嚴密貼合，使液體樣品迅速達到設定溫度，從而減少實驗時間。深圳準確qPCR儀作用

q225 加樣孔板側壁和金屬熱塊能夠嚴密貼合，使液體樣品迅速達到設定溫度，從而減少實驗時間。右上為 q225 在一次40 個循環的常規qPCR 實驗內加熱塊溫度變化情況，在整個實驗過程中金屬塊升降溫迅速且溫度穩定，不受機器本身隨實驗時間延長而內部背景溫度上升的影響。qPCR 反應所需時間很大程度上取決于對反應溶液進行變溫所需要的時間，而這一過程又受到加熱塊升降溫速度和液體升降溫速度兩方面的影響。q225 所使用的熱循環系統峰值變溫速率可達4°C/s，更重要的是，經過精密設計的加熱塊能夠很大程度地貼合孔板形狀，實現高效的熱傳導，使得在加熱塊達到預定溫度后反應溶液也能在短時間內達到相同溫度，反應溶液溫度更為均一。q225 出色的熱循環系統設計使得40 個循環的常規 qPCR 可以在短短43 分鐘內輕松完成，讓您的工作效率獲得質的提升 。SNP基因分型SNP分型用HRM高分辨熔解曲線方法來做，速度快，效率高。在進行大量SNP標記分型時無需合成熒光探針和熒光引物。可以的節省實驗成本。廣東相對定量qPCR儀報價PCR反應需要五種關鍵試劑：PCR模板、DNA聚合酶、引物、脫氧核苷酸三磷酸（dNTPs）、PCR緩沖液。

RealTimePCR是通過檢測反應體系中的熒光強度來檢測PCR擴增產物的,其熒光檢出方法可分為熒光嵌合法和熒光探針法兩大種類。熒光嵌合法(SYBRGreenI)的原理熒光嵌合法通常使用SYBRGreenI。SYBRGreenI是一種能夠結合于所有dsdna雙螺旋小溝區域的具有綠色激發長的染料。它與PCR合成的雙鏈DNA結合,在激發光照射下產生熒光,通過熒光強度的檢測,可以實時監測PCR擴增的產物量。熒光嵌合法(SYBRGreenI)的原理熒光嵌合法通常使用SYBRGreenI。SYBRGreenI是一種能夠結合于所有dsdna雙螺旋小溝區域的具有綠色激發長的染料。它與PCR合成的雙鏈DNA結合,在激發光照射下產生熒光,通過熒光強度的檢測,可以實時監測PCR擴增的產物量。

Quantagene q225 PCR儀快速 分秒必爭，43 分鐘完成40 循環qPCR 實驗;準確 精細定量，數據可靠更勝一籌;節省 5-10 ul 反應體積，更少的試劑與樣品需求;小巧 輕巧身材，節約空間，更能輕松攜帶.主要特點:精確定量   以可靠的數據助力您的研究采用擬合算法計算 Ct 值，定量誤差不超過±10%。液體冷卻循環系統確保孔間溫度高度一致，溫差不超過 ±0.15°C。光學系統無運動部件，穩定性增加，長期使用無需校準與維護。的儀器間重復性，不同位置、不同反應體積均不影響定量結果。快速高效   用更短的時間獲得更多數據40 個循環的常規 qPCR 需43 分鐘，較常見qPCR 儀多縮短60% 的時間。在提高速度的同時保持了96 孔的高通量，滿足絕大多數實驗需求。小巧輕便 節省空間及您的寶貴樣品小體積為移動實驗和大量部署提供可能。5-10 μl 的推薦反應體積，較常規實驗節省80%的試劑用量，更節約您的珍貴樣品。PCR的種類根據化學發光原理可以分為：SYBR染料法和TaqMan探針法。

常規PCR中，PCR產物通過凝膠電泳，然后進行成像分析，常規PCR只能通過終點法對擴增產物進行定性分析，而不能進行定量分析；熒光定量PCR中，PCR反應體系中加入了熒光分子，通過熒光信號的變化來反應擴增產物的變化，使PCR產物的實時檢測成為可能。相對常規PCR而言，熒光定量PCR的主要優點是準確地確定初始模版拷貝數和較高的檢測靈敏度；熒光定量PCR不僅可用于定性，如判斷一段序列的有無，也可用于定量，如確定起始模版的拷貝數；常規PCR的定量方法，測定的都是PCR的終產物，而不是起始DNA拷貝數。而從圖中可以看出，雖然相同模版在同一臺PCR儀上進行96次擴增，終點處檢測產物量不恒定，但96次PCR擴增曲線都有一個共同的拐點，即熒光定量PCR中Ct值的重現性，恒定的Ct值為熒光定量PCR的分析提供了理論依據。利用SYBR Green I可以檢測PCR反應中獲得的全部雙鏈DNA,但是不能區分不同的雙鏈DNA。深圳節省qPCR儀使用說明

實時熒光定量聚合酶鏈式反應（PCR）指的是在PCR進行的同時，對其過程進行監測的能力。深圳準確qPCR儀作用

原理：在DNA擴增反應中，通過熒光化學物質測定每次PCR循環后產物總量。目的：實現定量而不止是定性分析。通過與內參基因進行對比，對樣品中的特定基因進行相對表達量的計算，以實現定量分析。qPCR的檢測方法有兩種，SYBRGreenl法和TaqMan探針法，下面介紹常用的SYBRGreenl法。原理：在PCR反應體系中，加入過量SYBR熒光染料，使其特異性地摻入DNA雙鏈后，發射熒光信號，而不摻入鏈中的SYBR染料分子不會發射任何熒光信號，從而保證熒光信號的增加與PCR產物的增加完全同步。試劑及儀器：Hieff®QpcrSYBR®GreenMasterMix試劑(翌圣)和ABI7500Real-TimeSystem實時熒光定量PCR儀進行qRT-PCR擴增。深圳準確qPCR儀作用

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