作為時下的熱點技術，數字PCR是將核酸樣品分配到大量單獨、平行的微反應單元（nL，納升級別）中，使得每個反應單元中盡可能含有1個模板分子，并在此基礎上進行擴增、檢測和分布統計，從而實現靶標分子的比較 計數。（圖：數字PCR技術原理）根據微反應單元的不同形式，數字PCR產品可分為微板式、微滴式和芯片式等。目前，市場上主要的數字PCR產品主要是基于微滴式和芯片式，如Bio-Rad公司的QX200微滴式系統和ThermoFisher公司的QuantStudio系統等。與一、二代PCR技術相比，數字PCR具有很多優勢：一是特異性、靈敏性均有顯著提高；二是在不依賴內參和標準曲線的前提下，可直接得到比較 量化指標；三是微反應單元相互獨立、封閉，避免了PCR抑制劑及不同核酸分子擴增產物間的相互干擾，準確度和可重復性較高。Drop-off數字PCR檢測方法的**主要優勢是能夠能夠在一個反應中檢測到基因組序列范圍短的同源基因突變。微滴式數字PCR技術

在使用dPCR進行轉基因檢測時，通常直接參照qPCR的方法。使用不同技術對相同樣品檢測時，兩種方法的靈敏度是否具有可比性成為關注的問題。Burns等21]使用Fluidigm公司的12.765（12板，每板765個微單元）芯片數字PCR分析儀測定標準物質ERM-AD413檢測轉基因玉米MON810。該小組應用dPCR技術評估在qPCR定義下的靈敏度數值，在拷貝數200-700之間，dPCR與qPCR的測量結果具有一致性。但與qPCR的靈敏度相比，dPCR在低于拷貝數200時有被低估的風險，在高于拷貝數1000時有被高估的風險。dPCR在同一陣列上同時測量轉基因和內源性靶點時，需要稀釋內源性靶點和轉基因靶點在合理拷貝數范圍內以保證dPCR測量結果的準確性。美國全自動多重數字PCR樣品回收數字PCR是直接數出DNA分子的個數，是對起始樣品的定量。

數字聚合酶鏈式反應（digitalpolymerchainreaction，dPCR）技術因具有高靈敏度、受基質干擾少等優勢而被廣用于轉基因食品檢測。本研究綜述了數字PCR技術的原理、系統各部件的優劣勢，梳理了數字PCR技術在轉基因檢測與溯源技術（標準物質）方面的進展和發展趨勢，以期為轉基因食品檢測領域提供參考依據。dPCR的擴增過程大致上可以分為3步：樣品的分散、樣品的熱循環擴增和樣品的檢測。對于數字PCR儀器系統，各個部件之間仍然有較大的改進空間，要發揮部件之間的協同作用是很重要的，而且有持續研究的價值。表1中總結了部分常見的數字PCR系統的類型，以及相對在硬件、便攜性、性價比和自動化程度上的比較。

數字PCR技術的出現不是為了完全取代原有分子診斷技術，而是更好的補充和完善現有技術平臺。數字PCR為不同應用場景下的多樣化核酸檢測需求提供了新的思路，尤其是在臨床檢測方面。國產數字PCR企業在商業化應用方面，也不斷“攻城略地”。數字PCR作為當下靈敏的核酸檢測技術，盡管目前國產數字PCR企業異軍突起，在臨床市場中實現了彎道超車，但未來仍然需要聚焦客戶需求，不斷夯實底層創新，同時在檢測成本、自動化、試劑盒申報注冊、出海國際化等方面不斷努力，提供更為的解決方案。國際局勢，波譎云詭。在百年未有之大變局，實現中華民族的偉大復興，需要國內企業瞄準技術高地，以爭分奪秒的精神，解決技術"卡脖子"的難題，不斷攻堅克難，自主創新，在與國際品牌的同臺競技中，彰顯中國實力。數字PCR在檢測珍貴樣品和樣品核酸存在降解時具有明顯的優勢。

數字PCR的引物和探針設計規則同熒光定量PCR是類似的，具體規則如下：1、查找和選擇目標序列設計引物和探針的第一步是得到感興趣基因的核酸序列。找到基因保守區域：基因的保守區域是指來自同一屬/種/亞型的、在某個基因上堿基序列差別很小或沒有差別的區域。根據需要，使用ClustalX或ClustalW等軟件對齊屬于同一屬/種/亞型的基因的一組序列，在對齊序列的保守區域設計引物，并確保引物結合位點處的保守序列與其它非待檢測的屬/種/亞型的堿基序列具有較大的差異。擴增產物長度（AmpliconLength）：可在75-200bp之間（產物長度=下游引物位置-上游引物位置+1）。3D數字PCR是基于納米流體芯片進行檢測，通過一次檢測，將樣品分到數千個單獨的PCR。微滴式數字PCR儀器

模板 DNA 量越多，熒光達到域值的循環數越少，即 Ct 值越小。微滴式數字PCR技術

PCR（PolymeraseChainReaction）技術，即聚合酶連反應，是一種擴大和復制目的片段DNA的技術，其發現對于生命科學的發展具有重要的意義。而3D數字PCR到底是什么鬼？它其實是出現的一款PCR儀，其具有對目的DNA分子做出定量的優點，進而提供的準確性、靈敏度。應用該技術，實現對DNA進行精確定量，精確度可通過復制次數實現。通過準確性的進行定量檢測基因，有助于臨床上在、病毒等疾病作參考。同時，其具有高通量，檢測速度快，成本相對低等優點，為后期精細奠定基礎。微滴式數字PCR技術

廣州雙螺旋科學儀器有限公司成立于2015-04-17，同時啟動了以臻準,美國艾科浦,銳訊生物,Sysmex,Eprerdia為主的數字PCR，純水機，病理切片機，倍性分析儀產業布局。是具有一定實力的精細化學品企業之一，主要提供數字PCR，純水機，病理切片機，倍性分析儀等領域內的產品或服務。隨著我們的業務不斷擴展，從數字PCR，純水機，病理切片機，倍性分析儀等到眾多其他領域，已經逐步成長為一個獨特，且具有活力與創新的企業。公司坐落于廣州市黃埔區銳豐三街4號617房，業務覆蓋于全國多個省市和地區。持續多年業務創收，進一步為當地經濟、社會協調發展做出了貢獻。