按培養基的營養成分是否完全區分:1.基本培養基,亦稱“較低限度培養基”。只能滿足微生物野生型菌株生長需要的培養基,稱為基本培養基,是含有營養要求較低成分的合成培養基,常用“[-]”表示。這種培養基往往缺少某些生長因子,所以經過誘變過的營養缺陷型菌株不能生長。2.完全培養基,基礎培養基添加血清等物質后,叫完全培養基,也叫(血清)細胞培養基。完全培養基可用來滿足微生物的各種營養缺陷型菌株的生長需要,常以“[+]”表示。3.補充培養基,凡是只能滿足相應的營養缺陷型生長需要的組合培養基,稱為補充培養基,它是在基本培養基中加入該菌株不能合成的營養因子而組成的。根據在基本培養基中加入的是A或B等營養因子代謝物而分別用[A]或[B]等來表示。需要控制pH值、溫度、氣氛等因素,以保證培養基的穩定性。巴氏梭狀芽孢桿菌合成培養基
培養基中營養物質濃度合適時微生物才能生長良好,營養物質濃度過低時不能滿足微生物正常生長所需,濃度過高時則可能對微生物生長起抑制作用,例如高濃度糖類物質、無機鹽、重金屬離子等不僅不能維持和促進微生物的生長,反而起到抑菌或殺菌作用。另外,培養基中各營養物質之間的濃度配比也直接影響微生物的生長繁殖和(或)代謝產物的形成和積累,其中碳氮比(C/N)的影響較大。嚴格地講,碳氮比指培養基中碳元素與氮元素的物質的量比值,有時也指培養基中還原糖與粗蛋白之比。例如,在利用微生物發酵生產谷氨酸的過程中,培養基碳氮比為4/1時,菌體大量繁殖,谷氨酸積累少;當培養基碳氮比為3/1時,菌體繁殖受到抑制,谷氨酸產量則大量增加。 TYC培養基常見的培養基有LB培養基,YPD培養基,M9培養基和DMEM培養基等。
培養基中谷氨酰胺作用及使用方法?幾乎所有的細胞對谷氨酰胺有較高的要求,細胞需要谷氨酰胺合成蛋白質,在缺少谷氨酰胺時,細胞生長不良而死亡。所以,各種培養液中都含有較大量的谷氨酰胺。谷氨酰胺在溶液中很不穩定,應置-20℃ 冰凍保存,用前加入培養基中。加有谷氨酰胺的液體培養基 4℃冰箱儲存兩周以上時,應重新加入原來量的谷氨酰胺。GlutaMAX-I是什么?培養細胞如何利用GlutaMAX-I?這個二肽有多穩定?GlutaMAX-I 即谷丙氨酸二肽,是一個L-谷氨酰胺的衍生物,其不穩定的 alpha-氨基用L-丙氨酸來保護。一種肽酶逐漸裂解二肽,釋放L-谷氨酰胺供利用。GlutaMAX-I 二肽非常穩定,即使在121磅滅菌20分鐘,GlutaMAX-I 二肽溶液有較小的降解,如果在相同條件下,L-谷氨酰胺幾乎完全降解。
培養基按成分分類有哪些?按形態分類:培養基按其不同的物理狀態,可分為液體、流體、半固體和固體4類,培養基的物理狀態取決于培養基中是否加人凝固劑或凝固劑的加入量。1、液體培養基(liquidnutrientmedium)不加任何凝固劑,常溫下以完全液態存在的培養基,如肉湯培養基或一般液體增菌培養基。2、流體培養基(semi-liquidmedium)在液體培養基中加入0.05%~0.1%的瓊脂粉,使其具一定黏度,即成流體培養基。加入瓊脂粉增加了培養基的黏度,降低空氣中的氧氣進人培養基的速度,能使培養基保持較長時間的厭氧條件,有利于一般厭氧菌的生長繁殖,如硫乙醇酸鹽培養基、改良馬丁培養基等。一般用于霉菌和厭氧菌檢查的液體培養基中可加人少量瓊脂使其成為流體培養。含血清培養基是一種以動物血清為主的培養基普遍用于誘導細胞分化和胚胎發育研究等方面。
胰島素(Insulin)作用普遍,包括調節脂肪和蛋白質的代謝以及促進細胞生長等。胰島素功能的發揮源于其對細胞的作用,進而引起組織乃至機體的整體反應。一般可將胰島素在細胞水平的作用分為三大類:代謝作用、促生長作用、以及代謝和促生長混合作用。胰島素對細胞的代謝調節作用主要是通過其與細胞膜上的胰島素受體(Insulin receptor, IR)相互作用而介導,而胰島素對細胞的促生長作用則是通過其與細胞膜上胰島素的樣生長的因子受體(IGF Receptor, IG)相互作用而介導的。在無血清細胞培養液中,常添加胰島素來維持細胞生長,調節細胞對葡萄糖、氨基酸和脂肪酸的攝取、利用和貯存,同時抑制糖原、蛋白質和脂肪的分解。微生物的供能方式會影響它對營養物質的利用,因此不同微生物需要不同成分的培養基。MS維生素
如果細菌的生長受到限制,可以嘗試調整培養基的成分或添加輔助物質,例如控制培養基中氧氣的含量。巴氏梭狀芽孢桿菌合成培養基
細胞培養過程中,細胞培養基是不可或缺的,細胞培養基既是培養細胞中供給細胞營養和促使細胞生殖增殖的基礎物質,也是培養細胞生長和繁殖的生存環境。通常細胞體外培養時需要加入血清,以維持細胞的生長和存活。而除了血清之外,部分細胞在培養過程中需要添加胰島素和β-巰基乙醇(β-mercaptoethanol)等成分來維持細胞狀態。MCF-7和NIH:OVCAR-3等細胞需要額外添加胰島素,而Thp-1和MC3T3-E1 subclone 14等細胞則需要添加β-巰基乙醇,不同細胞加入量會有差異,需根據細胞類型判斷。巴氏梭狀芽孢桿菌合成培養基
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