I型鼠尾膠原是借鑒NavneetaRajan,JasonHabermehl法,經過乙酸抽提、離心、滅菌、透析等步驟制備得到的高純度、高活性膠原蛋白,屬于醫藥級別產品,可用于包被細胞培養器皿(單分子層包被),適合多種類型細胞的貼壁如肝臟細胞、神經節細胞、胚胎細胞、肌細胞、肺細胞、神經鞘細胞等。I型膠原蛋白包被細胞培養板,規格為6/24孔板,表面經I型膠原蛋白包被,可以很好的降低蛋白質的吸附。使用這種細胞培養板培養細胞,可以獲得良好的細胞貼壁率,細胞增殖速度快,形態均一,細胞培養成功率高。制備鼠尾膠原:將尾腱置于平皿內剪碎,轉移至三角燒瓶中。廈門正規鼠尾膠原廠家現貨
三維膠原的制備:鼠尾膠原蛋白I型在濃度1mg/ml以上,pH7左右時可形成具有一定強度三維膠,建議成膠濃度1-2mg/ml。膠原蛋白溶解于0.006mol/L乙酸中,在成膠過程中需要加入0.06X體積的0.1mol/LNaOH來中和。需要的溶液(均需要無菌、預冷):10xPBS(可含10mg/L的酚紅用于pH指示)或10x培養液,0.1mol/LNaOH,0.1mol/L乙酸(一般不用),雙蒸水A.不含細胞的三維膠原的制備(以配制1毫升,1mg/ml三維膠為例):將200ul鼠尾膠原蛋白I型(5mg/ml)加到置于冰浴的離心管中,加入690ulH2O。然后加到12ul0.1mol/LNaOH中(如果反過來把12ul0.1mol/LNaOH加到膠原溶液中,會由于NaOH不能迅速混勻而產生局部的膠原凝結),立即混勻。廣州正規鼠尾膠原哪里買對于生物科研汪們來說,大白鼠、小白鼠們簡直渾身是寶。
鼠尾膠原蛋白Ⅰ型使用方法及注意事項:將培養器皿在室溫(25度左右)下放置20分鐘待膠凝固后,轉移到培養箱內。如果配制中使用的是10PBS,使用前需要加入適當體積的細胞培養液預平衡。B.含細胞的三維膠原的制備(以配制200ul鼠尾膠原蛋白(5mg/ml)加到(如果反過來把12ul0.1mol/LNaOH加到膠原溶液中,會由于NaOH不能迅速混勻而產生局部的膠原凝結),立即混勻。再加入23ul10PBS10培養液,混勻(混勻后pH左右,如果PBS或培養液中沒有加酚紅,初次使用時需要用pH試紙測試)。加入760ul的細胞懸浮液,混勻后立即加到培養器皿中。將培養器皿在室溫下放20分鐘待膠凝固后,加入適當體積的細胞培養液,轉移到培養箱中培養。注意事項型在室溫下pH中性時可迅速成膠,在操作過程中要盡量保持低溫。鼠尾肌腱膠原蛋白I(rattailtendoncollagentypeI)根據Birkedal-Hansen方法,經過醋酸(HAc)抽提、氯化鈉沉淀、磷酸氫二鈉沉淀等步驟制備所得。
一種生物醫用鼠尾膠原蛋白的提取方法:1.用0.03?0.06mol/L的檸檬酸溶液溶解沉淀物,成透明澄清黏稠溶液;在冰水浴中,調節pH=6.5,用的3?6mol/L的NaCl溶液緩慢加入上清液中,不斷攪拌至溶液中白色的絮狀物不再析出,4°C沉淀10小時,去除上清液,去除上清液,絮狀溶液高速冷凍離心處理,收集沉淀;2.用0.03?0.06mol/L的檸檬酸再次溶液溶解沉淀物,成透明澄清黏稠溶液,冰水浴中,調節PH=6.5;溶液依次通過陽離子交換樹脂、陰離子交換樹脂進行脫鹽處理;(8)將脫鹽后的膠原蛋白溶液,-40至-20°C預凍2?4小時,然后真空冷凍干燥,凍干產品經進一步處理得到含水率在3%以下的膠原蛋白微粉,滅菌、包裝,得到成品膠原蛋白粉末。利用鼠尾Ⅰ型膠原構建與人類自體骨組織化學成分和分子結構相近的仿生骨材料。
膠原蛋白的提取方法:酸法提取:酸法提取主要采用低離子濃度酸性條件浸漬處理原料,從而破壞分子間的鹽鍵和希夫堿,而引起纖維膨脹、溶解。作為溶劑使用的酸,主要有鹽酸或亞硫酸、磷酸、硫酸、醋酸、檸檬酸和甲酸等。酸法是提取膠原蛋白比較常用和有效的方法,用酸法提取的膠原較大程度地保持了其三股螺旋結構。此法處理快速,所得產品的分子量是連續的,適用于醫用生物材料及原料的制備,但產品得率低,設備腐蝕嚴重,污染重。趙蒼碧等[2]采用0.3%的醋酸溶液在4℃下從牛腱中提取膠原蛋白,得到高純度的膠原蛋白溶液。結論鼠尾膠原能促進毛細胞貼壁。寧波正規鼠尾膠原哪家好
鼠尾膠原醋酸溶解:在2-8度中放置過夜。廈門正規鼠尾膠原廠家現貨
除了讓細胞更好貼上去,鼠尾膠原蛋白還能用于制備三維膠,這樣可以在培養皿中一定程度上模擬身體內部的生長環境,讓細胞在更真實地條件下進行生長。當然,除了這些,耗子尾汁還能做到很多事情,只需要打開網站——知網,輸入鼠尾膠原蛋白就能看到,例如鼠尾膠原蛋白可用于制備防皺保濕或美白產品,制作止血海綿敷料等各種用途。NO.3鼠尾DNA除了從整條鼠尾中提取的鼠尾膠原蛋白,老鼠的尾巴尖尖也是制備「耗子尾汁」的好材料。這類「耗子尾汁」通常用來鑒別耗子的基因型,對于轉基因小鼠而言,如果無法通過毛色來分辨動物的基因型,往往會選用經典的PCR法。廈門正規鼠尾膠原廠家現貨