RNA的提?。罕娝苤?,Trizol是一種RNA提取試劑,內(nèi)含異硫氰酸胍和酚等物質(zhì),能迅速破碎細(xì)胞和溶解細(xì)胞中的其他成分,壓制細(xì)胞釋放出核酸酶,維持細(xì)胞中RNA的穩(wěn)定性,我們可以在反應(yīng)物中加入Trizol后搖勻,在加入氯仿離心,這樣的話我們的RNA就進(jìn)入了水相中,再用異丙醇沉淀水相中的RNA,即可達(dá)到提取總RNA的目的了。首先我們需要稱取一定量的預(yù)處理好的廢酵母配10%左右的酵母溶液,在一定溫度下,加入一定濃度的氯化鈉,之后加入NaOH溶液調(diào)節(jié)反應(yīng)的pH,攪拌抽提一定時(shí)間后,離心分離上清液,調(diào)節(jié)pH至等電點(diǎn),經(jīng)酒精沉淀獲得核糖核酸,用水定容至100mL取1m適當(dāng)稀釋,調(diào)pH7.0,這樣的話RNA就出現(xiàn)了,分別測(cè)定吸光值A(chǔ)260和A280并計(jì)算A260/A280,就可以測(cè)定RNA的提取率了。當(dāng)然啦,我們還可以進(jìn)行深入研究,如測(cè)定Nacl的濃度,PH的大小,以及抽提時(shí)間對(duì)RNA提取率的影響啦。普通的提取實(shí)驗(yàn)用國產(chǎn)的試劑盒就足以,價(jià)格不高,基本上各地均有現(xiàn)貨。南京北京RNA提取試劑
總RNA提取試劑,適用于動(dòng)植物細(xì)胞或組織及細(xì)菌的總RNA抽提,可有效防止RNA在提取過程中的降解。獲得的RNA可直接用于Northern雜交,純化mRNA,體外翻譯,RNase保護(hù)實(shí)驗(yàn),RT-PCR以及cDNA克隆等一系列操作。該試劑可用于100次總RNA提取(10平方厘米細(xì)胞或100mg組織)。總RNA提取試劑注意事項(xiàng):1,RNA提取過程中所用器皿、離心管、吸頭等應(yīng)保證無污染無RNA酶。操作中應(yīng)小心,防止外源性RNA酶污染樣品導(dǎo)致RNA樣品降解。2,試劑中含有酚等有害物質(zhì),注意個(gè)人防護(hù)。自備新開封或?qū)iT氯仿,異丙醇,75%乙醇,DEPC處理水。鄭州正規(guī)RNA提取試劑供應(yīng)商血漿/血清RNA提取試劑盒:30~40分鐘內(nèi)即可完成提取過程,提取的總RNA純度高。
通用多糖多酚植物RNA提取試劑盒自主研發(fā)生產(chǎn),博取眾家之長(zhǎng),根據(jù)多年來市場(chǎng)反饋不斷進(jìn)行技術(shù)升級(jí)和改良得來。具有操作步驟少,實(shí)驗(yàn)快捷,RNA產(chǎn)量純度高,充分滿足后續(xù)實(shí)驗(yàn)要求的需要,適用提取樣品普遍等特點(diǎn)。產(chǎn)量:每100mg樣品提取的RNA平均值在20-50ug不等。純度:OD值一般在1.9以上。得到的RNA無DNA污染,可直接用于反轉(zhuǎn)錄,實(shí)時(shí)熒光定量PCR(尤其對(duì)RNA溶液中DNA非常敏感)等所有后續(xù)實(shí)驗(yàn)。1、快速:多糖多酚植物RNA提取試劑盒提取RNA的整個(gè)實(shí)驗(yàn)操作步驟簡(jiǎn)化快捷從時(shí)間因素考量上較大限度的防止RNA在提取中的降解(一般樣品十多分鐘就能完一個(gè)樣RNA的提取,較大縮短了一般試劑盒提取所需要的半小時(shí)甚至更長(zhǎng)的時(shí)間,)。2、高產(chǎn)量:多糖多酚植物RNA提取試劑盒擁有較強(qiáng)細(xì)胞裂解液,保證后續(xù)RNA提取的得率。(能完全通過化學(xué)方法徹底裂解細(xì)胞讓RNA釋放完整,并且有效成分能壓制內(nèi)源RNA酶的降解作用)
RNA提取試劑的選擇:首先,要確定材料的可用性。盡管現(xiàn)有的RNA提取試劑都用壓制RNase的成分,但提取的材料仍需謹(jǐn)慎處理。提取的材料的新鮮度是獲取完整RNA的關(guān)鍵,但是由于種種原因無法立即從新鮮材料中提取RNA時(shí),使用Takara公司的樣品保護(hù)劑SampleProtectorforRNA/DNA可以免去使用液氮或超低溫冰箱的不便,同時(shí)也可以有效解決組織、細(xì)胞樣品的短時(shí)間保存及運(yùn)輸問題。此外,如果將不同時(shí)期收集的樣品都預(yù)先存放于本試劑中,可以做到立即終止并固定RNA表達(dá)的時(shí)序變化,減少實(shí)驗(yàn)組間的誤差~帶口罩、帽子,屏住呼吸、不說話,帶乳膠手套并要時(shí)常更換。
RNA快速提取試劑盒:隨著對(duì)小RNA的研究的逐漸深入,小RNA的分離逐漸成為一種需求,百泰克利用雄厚的研發(fā)實(shí)力,開發(fā)出高效快捷的小RNA分離純化試劑盒,對(duì)各種不同來源的樣品(動(dòng)物、植物、細(xì)胞等)均取得滿意的效果。miRNA提取試劑盒采用自創(chuàng)的結(jié)合洗脫技術(shù),對(duì)小RNA,包括RNA(miRNA)、smallinterferingRNA(siRNA)、smallnulcearRNA(snRNA)均能很好的回收。產(chǎn)品特點(diǎn):高效分離小RNA,同時(shí)分離總RNA。富集200nt以下的小RNA,增加其用于下游實(shí)驗(yàn)的濃度??焖佟?0分鐘完成實(shí)驗(yàn)。可用于miRNA、siRNA、shRNA和snRNA分析。適用于各種來源的樣品。植物花總RNA提取試劑盒:采用進(jìn)口硅基質(zhì)膜制作的總RNA吸附柱,配合特殊的提取緩沖液。正規(guī)RNA提取試劑廠家直銷
總RNA提取試劑:提取的總RNA完整性好,無蛋白和DNA污染,可用于各種分子生物學(xué)常規(guī)實(shí)驗(yàn)。南京北京RNA提取試劑
DNA和RNA的鑒別染色:利用吖啶橙的變色特性可鑒別DNA和RNA。吖啶橙作為一種熒光染料已被用于染色固定,非固定細(xì)胞核酸,或作溶酶體的一種標(biāo)記。觀察死亡細(xì)胞熒光變色性變化以及區(qū)別分裂細(xì)胞和靜止細(xì)胞群體。雖然測(cè)定DNA和RNA含量時(shí)較難獲得好的重復(fù)性結(jié)果,但該方法已被許多實(shí)驗(yàn)室普遍采用。RNA是核糖核酸,DNA是脫氧核酸。區(qū)別:溶解性:都溶于水而不溶于乙醇,因此,常用乙醇來沉淀溶液中的DNA和RNA。DNA溶于苯酚而RNA不溶,故可用苯酚來沉淀RNA。南京北京RNA提取試劑