無血清凍存液使用方法:1、收集懸浮細胞或貼壁細胞,離心去除上清培養液。2、加入適量的細胞凍存液,重懸細胞,調節密度至1-5x10*↑/mL。3、將加有凍存液的細胞懸液分裝至凍存管中。4、將凍存管直接轉移至-80C水箱中冷凍保存。5、儲存條件:2-8C保存,年有效:-20C保存,兩年有效。無血清凍存液注意事項:1、請選擇對數生長期細胞進行凍存。2、凍存液加入細胞后,請盡快放入-80C冰箱凍存。3、本產品凍存細胞可以在-80°C冰箱保存3年以上。4、若需長期凍存細胞,請轉移至液氮罐中貯存。5、凍存液中含DMSO成分,為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套。1000 rmp離心5分鐘,去除離心管中的上清液,收集細胞沉淀。石家莊正規無血清細胞凍存液生產廠家
產品特性:a.可直接放置于-80℃冰箱,無需降溫,節省時間和精力;b.即用型,無需現配,操作方便,可減少實驗中因操作引起的污染;c.在多種哺乳細胞系中經過性能驗證,其復蘇率和活率達90%以上;d.可長期存儲于-80℃冰箱(5年以上),取用方便;e.采用成分明確的無血清配方,價格比常規自配細胞凍存液更為低廉;保存溫度:2~8℃具體操作步驟:1、培養皿或培養瓶中細胞按常規方法消化,或分離獲得原代細胞后,收集于離心管中。2、使用離心機離心,去除上清,收集細胞沉淀。3、根據細胞生長密度加入適量的細胞凍存液進行重懸,充分混勻(推薦凍存密度為1-2×106/ml)。4、將細胞懸液分裝至凍存管中,直接放置于-80℃冰箱保存。24小時后可移入液氮長期保存(可選)。貴陽無血清細胞凍存液推薦廠家適量地稀釋后,將細胞混合液移至事先準備好的培養瓶中。
細胞凍存是細胞培養技術中細胞進行保種并長期保存的常用方法,其中細胞凍存液,作為細胞凍存時必須使用的一種溶液,不光光是說只是用來進行細胞的保存,在細胞的購買、寄贈、交換和運送過程中也起著關鍵作用,因此選擇一款好的細胞凍存液就尤為重要。如果不加任何條件直接凍存細胞,細胞內和外環境中的水都會形成冰晶,能導致細胞內發生機械損傷、電解質升高、滲透壓改變、脫水、pH值改變、蛋白變性等,從而引起細胞死亡。而細胞凍存液就相當于細胞的保護劑,在凍存細胞時將細胞懸浮于凍存液中,可使冰點降低,提高細胞膜對水的通透性,在緩慢的凍結條件下,能使細胞內水份在凍結前透出細胞,可以防止或減少冷凍冰晶對細胞的損傷作用。這樣就使細胞暫時脫離生長狀態而將其細胞特性保存起來,在需要時直接復蘇就可恢復細胞活性。
細胞冷凍的原理:細胞凍存及復蘇的基本原則是慢凍快融,實驗證明這樣可以比較大限度的保存細胞活力。如今細胞凍存多采用甘油或二甲基亞砜作保護劑,這兩種物質能提高細胞膜對水的通透性,加上緩慢冷凍可使細胞內的水分滲出細胞外,減少細胞內冰晶的形成,從而減少由于冰晶形成造成的細胞損傷。復蘇細胞應采用快速融化的方法,這樣可以保證細胞外結晶在很短的時間內即融化,避免由于緩慢融化使水分滲入細胞內形成胞內再結晶對細胞造成損傷。細胞凍存是細胞保存的主要方法之一。利用凍存技術將細胞置于-196℃液氮中低溫保存,可以使細胞暫時脫離生長狀態而將其細胞特性保存起來,這樣在需要的時候再復蘇細胞用于實驗。而且適度地保存一定量的細胞,可以防止因正在培養的細胞被污染或其他意外事件而使細胞丟種,起到了細胞保種的作用。除此之外,還可以利用細胞凍存的形式來購買、寄贈、交換和運送某些細胞。細胞凍存時向培養基中加入保護劑--終濃度5%.15%的甘油或二甲基亞砜(DMSO),可使溶液冰點降低,加之在緩慢凍結條件下,細胞內水分透出,減少了冰晶形成,從而避免細胞損傷。采用"慢凍快融"的方法能較好地保證細胞存活。無血清細胞凍存液的優勢:因不含血清,批次間差異小。
使用方法:1)細胞超凈臺無菌環境,1.5mlEP管內加入細胞混懸劑均勻混懸細胞,細胞終濃度為5×106個/ml,混懸液體積為200μl。細胞凍存劑冰水混合物中預冷,逐滴加入細胞凍存劑800μl,細胞混懸劑與細胞凍存劑的體積比控制在1:4。2)開啟程序性降溫,降溫速率為1℃/min,較后降溫至-80℃以下進行凍存。將比較例1凍存后細胞的復蘇率與實施例5凍存后細胞的復蘇率進行對比,具體結果如附圖1所示,可見采用本發明的凍存方法能夠明顯提高細胞的復蘇率。其他實施例通過與比較例1進行比較,也得到相同的試驗結果。本發明的凍存方法不僅可以明顯提高凍存后細胞復蘇率,同時還可減少不同批次細胞凍存復蘇率不穩定、以及避免由血清中的支原體,細菌,朊細菌及其他細菌顆粒引發的污染。無血清細胞凍存液產品性能:為了避免反復凍融,傳統的細胞凍存液,分裝成小管后置于-20℃環境下保存。成都正規無血清細胞凍存液直銷廠家
無血清細胞凍存液,用于各種動物細胞株(tumour細胞和常規細胞),凍存細胞可在-80℃長期保存。石家莊正規無血清細胞凍存液生產廠家
細胞凍存及復蘇的基本原則是“慢凍快融”,這樣可以較大限度的保存細胞活力。目前細胞凍存多用二甲基亞砜(DMSO)作為保護劑,這兩種物質能提高細胞膜對水的通透性;緩慢冷凍可使細胞內的水分滲出細胞外,減少細胞內冰晶的形成,從而減少冰晶對細胞的物理損傷。復蘇細胞采用快速融化的方法可以保證細胞外結晶在很短的時間內融化,避免由于緩慢融化使水分滲入細胞內形成胞內再結晶對細胞造成損傷。血清完全細胞凍存液,通用于各種動物細胞株。特別配方有效提高細胞存活率和活力。不含動物來源性蛋白,能減少各類病毒、霉菌和支原體等污染,確保凍存細胞安全。適合用于無血清培養細胞和蛋白表達細胞。石家莊正規無血清細胞凍存液生產廠家