與常規PCR方法相比,數字PCR有如下優勢:1、能夠***定量:常規PCR定量需要制定已知拷貝數的標準DNA曲線,但是由于待檢樣本與標準曲線不在統一體系,條件上會存在差異,另外加上PCR擴增效率的差異從而影響定量結果的準確性。而數字PCR不受標準曲線和擴增動力學影響,可進行***定量。2、樣本需求量低:適用于珍貴樣本或核酸降解嚴重的樣本。3、靈敏度高:數字PCR是將傳統PCR反應體系分割成數萬個 PCR反應,這些反應可以精確地檢測很小的目的片段差異、單拷貝甚至低濃度的混雜樣本。且能避免非同源異質雙鏈的形成。4、高耐受性:由于目的序列被分配到多個 反應體系中,***降低了背景信號和***物對反應的干擾,擴增基質效應大大減小。數字PCR ,就選浚和(上海)儀器科技有限公司,用戶的信賴之選,有需要可以聯系我司哦!寧夏分析數字PCR供應商
研究方向甲基化含量鑒定作為表觀遺傳學研究中重要的一個研究方向——甲基化程度分析,現階段有不同的方法或技術來進行研究:如傳統的亞硫酸氫鹽處理后的克隆測序統計法、抗體檢測法、定量PCR檢測法等。這些方法皆因方法學的問題而不能獲得精確的定量,而微滴式數字PCR系統通過對樣品的微滴化處理及目標因子的***拷貝數定量,為甲基化程度的精確定量檢測提供了一種全新 的技術。*****的伴隨診斷常用體液來源(如血液,胸腹水,唾液及尿液等)的待檢標本中的DNA,有正常脫落體細胞和病變脫落細胞兩種來源,前者的量遠大于后者。通過微液滴處理能在每個微液滴中有效減少正常體細胞DNA的干擾,實現**標記物的有效檢測,如EGFR,ALK,ROS1,KRAS、BRAF等基因的突變檢測、乳腺*/胃*的HER2基因擴增檢測等,應用于**精細醫學的伴隨診斷。河北安全數字PCR定制數字PCR ,就選浚和(上海)儀器科技有限公司,有需要可以聯系我司哦!
研究方向低豐度及稀有序列的精確定量目前對于低豐度目標序列的檢測,定量PCR、雜交、毛細管測序及NGS等方法都因受到背景DNA的干擾,使得檢測靈敏度及精確性都達不到精細定量的要求(如定量PCR檢測中Ct值大于33的情況下,其重復性就不是很高),而微滴式數字PCR系統通過**的微滴化處理,使得稀有的核酸序列從大量的背景DNA中分離出來,從而提高了檢測的靈敏度及重復性。此外,由于樣品微滴化處理的同時,也將樣品中可能存在的***劑進行了分裝,提高了數字PCR擴增對于***劑的耐受程度,因此可具體應用于很多臨床樣品(血液、尿液、糞便、痰液、腦脊液等)中對**核酸標記物的檢測。一般而言,毛細管電泳和定量PCR的檢測靈敏度約在10%;NGS的靈敏度可達到1%;而ddPCR的檢測下限為0.001%。
MicroDrop-100數字PCR系統具有如下優點:1、JUE對定量,結果判讀不需要依賴標準曲線;2、突破局限,檢測靈敏度可低至萬分之一;3、專利設計的具有高精度復雜三維微納防污染結構的微流控芯片,單張可同時處理1-8個樣本;4、一鍵式自動操作,20uLPCR體系可生成100,000微滴,8個樣本單次微滴生成 需2分鐘;5、FAM、HEX(VIC)雙熒光通道,半導體激光器做為激發光 源相比LED光源,穩定性高,功率穩定不影響檢測靈敏度,單色性能優異降低對檢測特異性的影響,且方向性好;6、檢測器為2個光電倍增管,靈敏度及增益優于MPCC或CCD,普通的硅光子計數器,增益為10^5,光電倍增管增益可以達到10^9;7、 知識產權的軟件系統可直接計算拷貝數、拷貝數濃度,CNV值,突變豐度;閾值線可自動或手動完成,每個樣本可單獨設定閾值線;輸出數據圖標、直方圖、一維圖、二維圖、濃度圖、95%置信度不確定性區間等;軟件可自動識別復雜微滴分簇四簇;軟件具備數據質控功能,支持陽性微滴數、陰性微滴數、總微滴數統計及這些指標的任意組合;單個樣本100,000微滴的反應體系以及高靈敏度的檢測系統,配以獨特的軟件系統,可以實現高達20重的PCR分析;8、單次檢測通量96個樣本,操作靈活;浚和(上海)儀器科技有限公司為您提供數字PCR 。
產品特點無需依賴傳統熒光定量PCR的標準曲線即可實現核酸的***定量。全封閉防污染設計,一鍵式自動化操作。采用主流可靠的解決方案,系統由微滴生成儀、微滴檢測儀、數據分析軟件組成,并可選配同品牌封膜儀、PCR儀等微滴生成采用油包水乳化微滴技術,在微管道中利用氣壓驅動,2mins生成高達10萬個皮升級的微滴,高效高產,支持多重數字PCR的開發。微滴生成芯片為高精度微流控芯片設計,三維微納防污染結構,一張芯片可同時處理8個樣本。微滴檢測使用雙通道熒光,支持EvaGreen染料法及探針法。檢測線性范圍達到6個數量級,基因突變檢測靈敏度高達0.01%。檢測通量高,可一次檢測高達96個樣本,支持靈活設定。全中文分析軟件,人性化界面設置,多種分析工具供用戶選擇。本系統為開放式平臺,可使用第三方PCR反應液,支持用戶自行開發試劑、產品??:?上海)儀器科技有限公司為您提供數字PCR ,有需求可以來電咨詢!遼寧應用廣數字PCR售后
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dPCR的基本原理目前dPCR主要有兩種形式,芯片式和液滴式,但基本原理都是將大量稀釋后的核酸溶液分散至芯片的微反應器或微滴中,每個反應器的核酸模板數少于或者等于1個。這樣經過PCR循環之后,有一個核酸分子模板的反應器就會給出熒光信號,沒有模板的反應器就沒有熒光信號。根據相對比例和反應器的體積,就可以推算出原始溶液的核酸濃度。可以使用幾種不同的方法來分配樣品,包括微孔板,毛細管,油乳劑和帶有核酸結合表面的小型化腔室陣列。樣品的分配使人們可以通過假設分子種群遵循泊松分布來估計不同分子的數量,根據泊松分布的原理,反應體系中目標分子的拷貝數可以通過公式A=-ln[(N-X)/N]*N計算,從而解決了多個目標分子存在于單個液滴中的可能性。寧夏分析數字PCR供應商