1.細胞培養基的種類按照細胞培養基的發展歷史,細胞培養基大致可分為平衡鹽溶液、天然細胞培養基、合成細胞培養基、無血清細胞培養基、限定化學成分細胞培養基等幾大種類。(balancedsaltsolution,BSS)BSS主要是由無機鹽、葡萄糖組成,它的作用是維持細胞滲透壓平衡,保持pH穩定及提供簡單的營養。其主要用于細胞的漂洗、配制其他試劑等。幾種常用的BSS配方如下(表1-1)。D-Hank's與Hank's的一個主要區別是前者不含有Ca2+和Mg2+,因此D-Hank's常用于配制胰酶溶液。因為Ca2+、Mg2+是細胞膜的重要組成成份,參與細胞粘附等功能,使用不含Ca2+、Mg2+的BSS可避免細胞結團。此外,Hanks液和Earle液是常用的BSS基礎溶液,前者緩沖能力較弱,適合于密閉培養;后者緩沖能力較強,適合于5%CO2的培養條件。天然培養基指來自動物體液或利用組織分離提取的一類培養基,如血漿、血清、雞胚浸出液等。其優點是營養成分豐富,培養效果良好,但缺點是成分復雜,來源受限且制作過程復雜、批間差異大。目前使用的天然培養基是血清,另外各種組織提取液、促進細胞貼壁的膠原類物質在培養某些特殊細胞也是必不可少。水解乳蛋白是乳白蛋白經蛋白酶和肽酶水解的產物。MCDB 131培養基不同于傳統培養基之處在于,其含有微量元素、腐胺、腺嘌呤及更高濃度的氨基酸和維生素。遼寧RPMI-1640細胞培養基廠家
在細胞培養實踐中,選擇合適的 DMEM 培養基至關重要。對于生長較快、粘附性低的細胞,如某些腫瘤細胞和雜交瘤細胞,高糖型 DMEM 培養基是理想之選,其高濃度葡萄糖能充分滿足這類細胞對能量的高需求,促進細胞快速生長。而對于一些原代細胞,因其對培養環境更為敏感,可能需要低糖型 DMEM 培養基,并根據細胞來源和特性添加特定的生長因子、營養補充劑等,定制專屬培養方案,為原代細胞提供**適宜的生長條件,提高原代細胞培養的成功率。吉林細胞培養基全國發貨即開即用液體配方,DMEM/F12節省配制時間,提升實驗效率。
Ham’sF-12K培養基是Ham’sF-12營養混合物的Kaighn’s改進型,在Ham’sF-12的基礎上提高了氨基酸和**酸的濃度,降低了葡萄糖的用量,并修改了鹽的成分和含量(Konigsbergs)。Ham’sF-12K培養基**初設計用于培養原代人肝細胞以及分化的大鼠和雞的細胞。針對***的細胞培養應用,我們提供多種組分的Ham’sF-12K改良培養基。酚紅在培養基中被用來作為PH值的指示劑,用以持續監測培養液的酸堿度,在低PH值時酚紅使培養液呈黃色,而較高的PH值時使培養液呈紫色,PH值~,**適合細胞培養。但酚紅也有一些缺點,研究表明酚紅可以模擬固醇類***(特別是雌***)的作用,因此在用到雌***敏感的細胞時(如乳腺組織),比較好使用不含酚紅的培養基。酚紅會干擾流式細胞分析時候的檢測。此外,一些無血清培養基的配方中若存在酚紅會干擾鈉-鉀平衡。青霉素-鏈霉素混合液通常也被稱為“雙抗”,是體外培養中為預防微生物污染**常用的***,其中,青霉素能夠干擾細菌細胞壁的合成,對革蘭陽性菌特別有效;而鏈霉素能夠與細菌核糖體30S亞單位結合,抑制細菌蛋白質的合成,對革蘭氏陰性菌和革蘭氏陽性菌均有效,但對革蘭氏陰性菌特別有效。青霉素和鏈霉素聯合使用可以預防絕大部分的細菌污染。
RPMI-1640細胞培養基RPMI-1640是Moore等人于1967年在美國紐約州法羅市的羅斯韋爾公園紀念研究所(RoswellParkMemorialInstitute,RPMI)開發出來的,RPMI是該研究所開發的一類細胞培養基,1640是培養基代號。RPMI-1640是改進型的McCoy‘s5A培養基,使用碳酸氫鹽緩沖系統,與大多數哺乳動物細胞培養基不同的是其典型的PH8的配方。RPMI-1640培養基常用初是為淋巴細胞培養專門設計的,現在已廣泛應用于各種正常細胞和ai細胞的培養,包括HeLa細胞、Jurkat細胞、MCF-7細胞、PC12細胞、PBMC細胞、星形膠質細胞和ai細胞,是使用常用為比較多的培養基之一。RPMIRPMI1640培養基相比其他培養基之所以具有獨特的效果,是因為其中含有還原劑谷胱甘肽和高濃度的維生素。RPMI1640培養基含有生物素、維生素B12以及PABA,這些成分是Eagle’sMEM和DMEM所不具備的。針對細胞培養應用,我們提供多種組分的RPMI1640改良培養基。Dulbecco’s 改良培養基–DMEM(Dulbecco’s Modified Eagle Medium)現已廣應用于各種細胞的培養。
RPMI-1640細胞培養基RPMI-1640是Moore等人于1967年在美國紐約州法羅市的羅斯韋爾公園紀念研究所(RoswellParkMemorialInstitute,RPMI)開發出來的,RPMI是該研究所開發的一類細胞培養基,1640是培養基代號。
我們提供多種組分的RPMI1640改良培養基。RPMI-1640細胞培養基L-谷氨酰胺(Glutamine)是細胞培養中所必需的一種營養元素,但其在溶液中不穩定,會自發降解,不含L-谷氨酰胺的培養基,可以根據研究需要任意調整L-谷氨酰胺的用量,在使用時添加新鮮的L-谷氨酰胺或其替代物更利于細胞的生長。L-丙氨酰-L-谷氨酰胺。Alanyl-glutamine,Ala-Glu),又名丙氨酰谷氨酰胺、丙谷二肽,是一種高級細胞培養添加劑,可直接替代細胞培養基中的L-谷氨酰胺。L-谷氨酰胺(Glutamine)是細胞培養中所必需的一種營養素,但其在溶液中不穩定,會自發降解生成氨和焦谷氨酸,其中氨對細胞有害;而L-丙氨酰-L-谷氨酰胺在水溶液中十分的穩定,不會自發的降解。細胞利用其機制是:在細胞培養時,細胞會逐漸向培養液中釋放一種肽酶,將L-丙氨酰-L-谷氨酰水解成L-丙氨酸和L-谷氨酰胺,而后細胞會將這兩種水解產物吸收利用。 DMEM培養基**初設計葡萄糖含量為1000mg/L(低糖型),后來又發展出葡萄糖含量為4500mg/L(高糖型)。浙江醫療細胞培養基廠家
Fischer’s培養基不含蛋白質、脂類或任何生長因子,故此產品需搭配血清或無血清添加物使用。遼寧RPMI-1640細胞培養基廠家
其本質為含有鹽、氨基酸、維生素和其他必需營養物的pH緩沖的等滲混合物。在此基礎上,DMEM、IMDM、HAMF12、PRMI1640等各種合成細胞培養基被不斷開發出來。常用合成培養基的配方此處不詳細介紹。MEM(MinimalEssentialMedium)培養基MEM(MinimalEssentialMedium)培養基有含Earle's平衡鹽的類型,也有含Hanks'平衡鹽的類型;有高壓滅菌型的,也有過濾除菌型的;還有含非必需氨基酸的類型。是基本、適用范圍廣的細胞培養基。DMEM細胞培養基DMEM(Dulbecco’smodifiedMinimalEssentialMedium)是由Dulbecco在MEM培養基的基礎上改良獲得的,各成分份量加倍,分低糖(1000mg/L)、高糖(4500mg/L)兩種類型。細胞生長快。附著稍差的腫瘤細胞、克隆培養用高糖效果較好,常用于雜交瘤的骨髓瘤細胞和DNA轉染的轉化細胞培養。IMDM細胞培養基IMDM(Iscove’smodifiedDMEM)是由Iscove在DMEM基礎上改良,增加了幾種氨基酸和胱氨酸量等。可用于雜交瘤細胞培養,以及無血清培養的基礎細胞培養基。RPMI-1640細胞培養基專門針對淋巴細胞培養設計,含有BSS、21種氨基酸、維生素等,適于多種正常細胞和腫瘤細胞的培養,也用做懸浮細胞培養。HamF12細胞培養基含微量元素。遼寧RPMI-1640細胞培養基廠家
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