精子手工計數原理及操作方法1.原理：將精液用適當的稀釋液作一定量稀釋后，混勻注入計數池內計數，再算出每毫升精液中精子數。2.方法（按照***版第四版《全國臨床檢驗操作規程》）1).于小試管內加精子稀釋液0.38ml,取液化精液20μl,加入稀釋液內混勻。2).充分搖勻后,滴入改良Neubauer計數板的計數池內,靜置1~2分鐘,待精子下沉后,以精子頭部作為基準進行計數。3.計算1).如每個**中方格內精子少于10個,應計數所有25個中方格內的精子數。2).如每個**中方格內精子在10~40個,應計10個中方格內的精子數。3).如每個**中方格內精子多于40個,應計數5個中方格內的精子數。公式：精子數=計數結果/計數中方格×25×1/計數池高度×20×103/ml=計數結果/計數中方格×1/計數池高度×5×103/ml傳統的CASA系統仍使用傳統閾值圖像處理方法，準確率有待提高。廣州山羊精子分析WOB

精子分析儀工作原理以灰度識別CASA為例，采用高分辨率的攝影技術與顯微鏡結合，**標本液化后吸入計數，通過顯微鏡放大后，用圖像采集系統獲取精子動、靜態圖像后輸入計算機。根據設定的精子大小和灰度、精子運動移位及運動參數，對采集圖像進行精子密度、活動力、活動率、運動特征等幾十項檢驗項目動態分析，由計算機處理后，打印出“**分析檢查報告以及精子動態特征分布圖”。一次能對1000個精子進行動態檢測分析，2-3分鐘即可完成檢測[1]。優點：操作簡便，用量少，檢測速度快，重復性優于人工檢測，并且能夠快速、準確的測定精子密度、活力、精子分級等，還可提供精子運動狀態的多種參數等。缺點：影響分析結果的因素較多，除**本身性質所含的固有誤差外，不同的精子計數池的相對準確性和精確性可產生明顯不一致的效果。上海計數精子分析DAPHamilton Thorne精子分析儀具備快速和高效的分析功能，能夠在短時間內處理大量樣本，提高工作效率。

醫生為了鑒定男性生育能力，常囑男方作精液檢查，正常精液顏色為灰白色或乳白色。如節欲時間長者，可呈淡黃色，若出現鮮紅色.暗紅色，則提示患者有炎癥或生殖道損傷。每次排精量為2~6毫升，常受排精次數與頻率的影響。新鮮精液呈稠厚膠凍狀，1小時之內應液化為稀薄的液體，用一根小玻璃棒插入精液中再提起，所形成的精液絲長度一般不超過2厘米，否則視為異常。精液呈弱堿性，PH值為7.2~7.8。正常精子數應超過2000萬/毫升。排精后1小時內活動精＞=50%。世界衛生組織推薦精子活動力分為四級：0級：不活動；1級：精子原地擺動；2級：有中等的前向運動；3級：前向運動活躍，快速直線運動。正常的精子活動力為2~3級的精子＞=40%~50%.精子形態：畸形精子小于50%。分析男性生育能力不能單從精液的一項指標定論，應對精子數量活力活動率液化時間畸形率等多方面進行綜合能力分析。采集精液前5～7天內必須停止性生活，并且不得有**、夢遺等情況，還應禁煙戒酒，忌服對生精功能有影響的藥物等。

二、生化及免疫學檢驗：1、精漿果糖測定【正常參考值】9.11-17.67mmol/L。【臨床意義】（1）精液果糖為0，可見于先天性兩側輸精管及精囊腺缺如、兩側輸精管完全阻塞或逆行**。（2）精液果糖降低，常見于精囊炎和雄***分泌不足，果糖不足可導致精子運動能量缺乏，甚至不易受孕。2、精漿酸性磷酸酶測定【正常參考值】金氏法：＞255nmol·s-1/L【臨床意義】（1）精漿酸性磷酸酶含量增高，常見于前列腺肥大或早期前列腺惡性**患者。（2）精漿酸性磷酸酶含量降低，常見于前列腺炎患者。（3）精漿酸性磷酸酶檢測是法醫鑒定有無精液**敏感的方法。3、精漿頂體酶活性測定【正常參考值】36.72±21.43U/L。【臨床意義】精子頂體酶活力與精子密度及精子頂體完整率呈正相關，其活力不足，可導致男性不育。4、精漿乳酸脫氫酶-X同功酶(LDH-X)測定【正常參考值】LDH-X***活性：2620±1340U/L；LDH-X相對活性：≥0.426。【臨床意義】LDH-X具有睪丸及精子的組織特異性，是精于運動獲能的關鍵酶，該酶檢測可作為診斷男性不育有價值的指標。睪丸萎縮患者LDH-X降低或消失，精子發生缺陷時無LDH-X形成，少精或無精者可致LDH-X活性降低。服用棉酚也可抑制此酶活性。Hamilton Thorne精子分析儀采用先進的光學成像，能夠實時分析精子的動力學參數，提供有效的精子質量評估。

CASA精子運動速度和運動軌跡特征主要參數有：①軌跡速度（VCL）：也稱曲線速度，即精子頭部沿其實際行走曲線的運動速度。②平均路徑速度（VAP）：精子頭沿其空間平均軌跡的運動速度，這種平均軌跡是計算機將精子運動的實際軌跡平均后計算出來的，可因不同型號的儀器而有所改變。③直線運動速度（VSL）：也稱前向運動速度，即精子頭部直線移動距離的速度。④直線性（LIN）：也稱線性度，為精子運動曲線的直線分離度，即VSL/VCL。⑤精子側擺幅度（ALH）：精子頭實際運動軌跡對平均路徑的側擺幅度，可以是平均值，也可以是最大值。不同型號的CASA系統由于計算方法不一致，因此相互之間不可直接比較。⑥前向性（STR）：也稱直線性，計算公式為VSL/VAP，亦即精子運動平均路徑的直線分離度。⑦擺動性（WOB）：精子頭沿其實際運動軌跡的空間平均路徑擺動的尺度，計算公式為VAP/VCL。⑧鞭打頻率（BCF）：也稱擺動頻率，即精子頭部跨越其平均路徑的頻率。⑨平均移動角度（MAD）：精子頭部沿其運動軌跡瞬間轉折角度的時間平均值。⑩運動精子密度：每毫升精液中VAP>0μm/s的精子數。HAMILTON THORNE精子分析儀可分析參數，直線性（LIN）?：曲線軌跡的直線性。快速運動精子分析頻閃光源

IVOS具有高分辨率和高靈敏度的特點，能夠捕捉到微小的細節和變化，進一步提高了精子分析的準確性。廣州山羊精子分析WOB

全自動的IVOS可以提供**快的分析速度以及高質量數據輸出。可以使用一次性的和可重復的載玻片，深度從10um～100um。每次分析捕捉100幀圖像，掃描速度每秒60幀。**的軟件升級。IVOS能提供：精確、客觀、具有重復性的結果。高速分析，在60Hz下半秒掃描30幀，為實驗室節省成本。[1]主要功能IVOS自動精子活動、濃度、形態分析系統。HamiltonThorne的CASA系統適用于臨床、研究實驗室、動物繁殖基地、水產業、制藥公司等各種領域，成為了精液分析業的金標準。可以應用于包括人類、公牛、馬、野豬、狗、兔子、老鼠、綿羊、山羊、魚以及各種瀕危動物。在TOXIVOS上有**的大鼠精液分析軟件。廣州山羊精子分析WOB