Buller等利用miR-146b的質粒轉染間充質干細胞,使其分泌的外泌體負載miR-146b,并將外泌體注射至移植到小鼠體內的GBM處。結果表明,這種利用外泌體運輸miRNA進行zhiliao的方法可以有效抑制中流的生長。對于GBM類腦部中流,體內zhiliao不同于體外細胞實驗,更需考慮腦部組織微環境對藥物的影響,外泌體可運輸miRNA并不破壞其在腦部中流組織處的原本功效。然而,至今還沒有利用外泌體載藥經靜脈注射zhiliaoGBM的報道,這主要是由于跨越血腦屏障(BBB)仍然是外泌體進行腦部中流zhiliao需要解決的難題。盡管如此,Wood等報道的在進行阿茲茨海默病zhiliao時利用對腦部神經元特異性肽RVG靶向的外泌體穿過BBB的研究顯示了經靶向修飾的外泌體具備穿過BBB的潛力,因此外泌體載藥zhiliao具有廣闊的前景。細胞外囊泡(EVs)表示了細胞間通訊的一個重要模式。唾液外泌體miRNA測序
外泌體(Exosome)是由細胞分泌而來的微小囊泡,直徑約為30-200nm,形態也呈現出多樣性。microRNA(miRNA)是一種大小約21—23個堿基的單鏈小分子RNA,是由具有發夾結構的約70—90個堿基大小的單鏈RNA前體經過Dicer酶加工后生成,不同于siRNA(雙鏈)但是和siRNA密切相關。microRNA通過和靶基因mRNA堿基配對引導沉默復合體(RISC)降解mRNA或抑制mRNA的翻譯,從而在轉錄后水平調控蛋白表達。microRNA在物種進化中相當保守,在動物、植物等中發現的microRNA表達均有嚴格的組織特異性和時序性。microRNA在細胞生長和發育過程中起多種作用,包括調控發育、分化、凋亡和增殖等。外泌體熒光標記染料外泌體給后續實驗產生了許多障礙。
多項研究表明中流細胞來源的外泌體能夠抑制免疫相關的信號通路、阻礙機體對中流的免疫響應。Chen等研究發現黑色素瘤細胞、乳腺ai和肺ai細胞會產生攜帶程序性死亡分子1的配體(programmedcelldeath1ligand1,PD-L1)的外泌體,此類外泌體在血液中循環,通過表面PD-L1與T細胞結合,導致T細胞在到達中流細胞之前即受到抑制,達到遠程干擾免疫細胞活性的效果。中流來源的外泌體能夠抑制骨髓來源的抑制性細胞(該細胞是樹突狀細胞(dendriticcells,DCs)、巨噬細胞和(或)粒細胞的前體,具有抑制免疫細胞應答的能力)對中流的免疫監督。中流細胞來源的外泌體與巨噬細胞共孵育后,其內的miRNA-301a通過下調抑ai基因PTEN),激huoPI3Kγ(phosphoinositide3-kinaseγ)信號分子,使巨噬細胞被“馴化”成為能參與抗yan反應、血管生成以及促進中流生長轉移的M2型巨噬細胞。
外泌體(Exosome)開始被認為是毫無作用的“垃圾”,但隨著研究的不斷深入,人們發現事實并非如此,外泌體(Exosome)是具有功能活性并可進行細胞間信息傳遞的微囊泡。外泌體(Exosome)介導瘤細胞的免疫耐受。瘤細胞來源的外泌體(Exosome)本身可作為瘤抗原,因此,瘤來源的外泌體(Exosome)既是一種抗原呈遞系統,同時也是瘤排斥抗原的來源。瘤來源的外泌體(Exosome)能夠通過傳遞某些抑制信號,在機體免疫應答過程中起負性調節作用,誘導瘤細胞形成免疫耐受,從而逃避免疫細胞的殺傷。癥狀細胞來源的外泌體含有與癥狀進展相關的分子。
外泌體攜帶的與疾病進展緊密關聯的分子標志物可用于疾病進展的監視、檢測和診斷,是一種潛在的非侵入性生物標志物。由于外泌體本身可以作為抗原提呈小泡,且有較長的循環半衰期,可用于免疫學相關研究,同時,源自ai細胞的外泌體可以被工程化,發揮免疫刺激作用,可作為中流疫苗應用于ai癥的免疫zhiliao。此外,外泌體穩定而廣fan地分布在qi官和組織中,具有低免疫原性、高耐受性等特點,且良好的膜滲透性可使其通過血腦屏障,因此可用作組織和qi官特異藥物輸送系統,兼有高輸送效率和低副作用。因此,外泌體適合用作藥物載體遞送zhiliao劑(如阿霉素或姜黃素),zhiliao性miRNA、siRNA等核酸和蛋白質,運送至靶位點后實現靶向zhiliao。外泌體可以直接進入受體細胞影響細胞功能。外泌體熒光標記染料
泌體是細胞內源性的小囊泡,由大多數細胞分泌。唾液外泌體miRNA測序
外泌體起源于多泡體,以細胞管腔內囊泡的形式存在.細胞的胞吞形成帶有外源性抗體的內體小泡,在高爾基體等細胞器的作用下形成早期核內體,早期核內體的囊膜內陷、突入形成多個小囊泡,并選擇性的接受細胞內的蛋白質、核酸、脂類等成分,較終形成晚期核內體,晚期核內體與細胞膜融合,并將外泌體排出胞外。這是一個連續而又復雜的過程,從內體小泡到成熟外泌體,需要在各細胞器間傳遞并包裝,包括:TSG101、Alix蛋白、CD63、CD81、神經酰胺、膽固醇等。外泌體的排出跟其他胞內小泡大致相同,受到Rab家族蛋白的調控,敲除細胞的Rab27a和Rab27b蛋白后,外泌體不能排出,且從高爾基體到晚期核內體的囊泡運輸不受影響。唾液外泌體miRNA測序
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